詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 有絲分裂激酶B抗體 |
英文名稱 | Aurora B |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無(wú)菌采制)
茜素絡(luò)合指示劑(IND) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:>98%
茜素絡(luò)合指示劑(高純級(jí),98%) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:高純級(jí),98%純度:
偶胂 I 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:>95%
堿性品紅(生物染色級(jí)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:BS(生物染色級(jí))純度:>95%
堿性品紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品純度:>98%
溴百里香藍(lán) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:堿指示劑純度:>95%
鉍試劑Ⅱ(CP) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:CP純度:>98%
鉍試劑Ⅱ(98%) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:>98%
鈹試劑Ⅱ 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥99%
溴鄰三紅 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥97%
鹽副品紅 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:BS,用于生物學(xué)染色純度:≥98%
燦爛黃 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
剛果紅(AR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:97%
鈣羧指示劑(AR) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥95%
鈣羧指示劑(Indicator) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:Indicator純度:≥98%
紅 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥97%
AGPA/Alpha 1 Acid Glycoprotein α1性糖蛋白1/類粘蛋白1一抗 * 0.2ml Spermidine
PIWIL4 piwi樣4蛋白一抗 * 0.1ml Spermidine phosphate salt hexahydrate
CARD7/NALP1 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7一抗 * 0.2ml Myriocin from Mycelia sterilia
NALP4 癌/抗原58一抗 * 0.2ml Spermidine trihydrochloride
NLRP10 富含亮氨重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10一抗 * 0.2ml Castaspermine
beta COP β衣被蛋白一抗 * 0.2ml Spermine tetrahydrochloride
Caspase 4/Caspase 11 半胱蛋白酶4/11一抗 * 0.2ml DLuciferin potassium
Caspase 14 半胱蛋白酶蛋白14一抗 * 0.2ml Ranitidine HCl
有絲分裂激酶B抗體21號(hào)染色體開放閱讀框33抗體Broussonin A中文名:別名:分子式:C16H18O3
CRTAM抗體Broussonin B中文名:別名:分子式:C16H18O3
心肌肌鈣蛋白抗體Furan-2-carboxylic acid中文名:別名:分子式:C5H4O3
多配體蛋白聚糖1抗體1,2-Benzenediol中文名:鄰苯二酚別名:分子式:C6H6O2
T細(xì)胞特異性趨化因子抗體Pyrogallol中文名:鄰苯三酚別名:Pyrogallic acid分子式:C6H6O3