詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 9號染色體開放閱讀框85抗體 |
英文名稱 | C9orf85 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn),。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
新疆溶桿菌 Lysobacterxinjiangensis
多食鞘氨醇桿菌 Sphingobacteriummultivorum
耳葡萄球菌 Staphylococcusauricularis
庫氏棒桿菌 Corynebacteriumkutscheri
科氏葡萄球菌解脲亞種 Staphylococcuscohniisubsp.urealyticus
頭葡萄球菌解脲亞種 Staphylococcuscapitissubsp.urealyticus
克氏葡萄球菌 Staphylococcuscohnii
百日咳鮑特菌 Bordelapertussis
腦膜炎奈瑟菌 Neisseria meningitidis
淋病奈瑟菌 Neisseriagorrhoeae
甘露醇發(fā)酵管20支甘露醇發(fā)酵管BR
1% NaC1甘露醇發(fā)酵管20支1% NaC1甘露醇發(fā)酵管BR
1% NaC1纖維二糖發(fā)酵管20支1% NaC1纖維二糖發(fā)酵管BR
1% NaC1甘露糖發(fā)酵管20支1% NaC1甘露糖發(fā)酵管BR
3% NaC1基脫羧酶對照發(fā)酵管20支3% NaC1基脫羧酶對照發(fā)酵管BR
3.5% NaC1基脫羧酶對照發(fā)酵管20支3.5% NaC1基脫羧酶對照發(fā)酵管BR
3% NaC1甘露醇發(fā)酵管20支3% NaC1甘露醇發(fā)酵管BR
3.5% NaC1甘露醇發(fā)酵管20支3.5% NaC1甘露醇發(fā)酵管BR
3.5% NaC1葡萄糖磷鹽胨水發(fā)酵管20支3.5% NaC1葡萄糖磷鹽胨水發(fā)酵管BR
基脫羧酶對照發(fā)酵管20支基脫羧酶對照發(fā)酵管BR
鳥脫羧酶肉湯發(fā)酵管20支鳥脫羧酶肉湯發(fā)酵管BR
3% NaC1鳥脫羧酶發(fā)酵管20支3% NaC1鳥脫羧酶發(fā)酵管BR
9號染色體開放閱讀框85抗體125mgCarnoy固定Ⅱ84-80-097792-45-596T唾結(jié)合Ig樣凝集素3(SIGLEC3)HPLC≥98%淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3檢測試劑盒20mgLAP1132-61-2化學(xué)試劑性神經(jīng)酰酶1(ACER1)50mgCarnoy固定Ⅱ84-80-01953-04-496T睫狀神經(jīng)營養(yǎng)子(CNTF)HPLC≥98%淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2檢測試劑盒20mgLEK1132-61-2化學(xué)試劑性神經(jīng)酰酶2(ACER2)
50mgCarnoy固定Ⅱ84-80-01953-04-496T睫狀神經(jīng)營養(yǎng)子(CNTF)HPLC≥98%淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2檢測試劑盒20mgLEK1132-61-2化學(xué)試劑性神經(jīng)酰酶2(ACER2)300mgDavidson's fixative58-27-555449-49-596T睫狀神經(jīng)營養(yǎng)子(CNTF)HPLC≥95%亮酰-半胱酰肽酶檢測試劑盒20mgGADPH71119-22-7化學(xué)試劑N-酰鞘醇酰水解酶2(ASAH2)
300mgDavidson's fixative58-27-555449-49-596T睫狀神經(jīng)營養(yǎng)子(CNTF)HPLC≥95%亮酰-半胱酰肽酶檢測試劑盒20mgGADPH71119-22-7化學(xué)試劑N-酰鞘醇酰水解酶2(ASAH2)200mgDavidson's fixative58-27-576822-34-996T血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)HPLC≥98%亮富含重復(fù)絲/蘇蛋白激酶2檢測試劑盒20mgPFK71119-22-7化學(xué)試劑鞘醇激酶1(SPHK1)
200mgDavidson's fixative58-27-576822-34-996T血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)HPLC≥98%亮富含重復(fù)絲/蘇蛋白激酶2檢測試劑盒20mgPFK71119-22-7化學(xué)試劑鞘醇激酶1(SPHK1)100mgAAF固定 醇、冰,、58-27-564-86-896Tα2-纖溶酶抑制子(α2PI)HPLC≥98%亮肽酶3檢測試劑盒20mgp-AKT71119-22-7化學(xué)試劑鞘醇激酶2(SPHK2)
100mgAAF固定 醇,、冰、58-27-564-86-896Tα2-纖溶酶抑制子(α2PI)HPLC≥98%亮肽酶3檢測試劑盒20mgp-AKT71119-22-7化學(xué)試劑鞘醇激酶2(SPHK2)25mg性酶-PAS聯(lián)合染色98-92-07085-55-496T血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)HPLC≥98%鏈激酶檢測試劑盒100mgp-IκB-α68399-77-9化學(xué)試劑軸突生長誘向子G1(NtnG1)