詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 |
英文名稱 | ARFIP1 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
(肼基羰基)二茂鐵(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記純度:≥98%
二亞砜(>99.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99.0%(GC)純度:≥98%
1,2,3,4四(>98.0%(GC) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)純度:≥98%
對茴香醛乙溶液(含乙和) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑純度:≥98%
二亞砜d6 99.9原子%D(>99.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99.0%(GC)純度:≥98%
重水 99.8原子%D 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:99.8原子%D純度:≥98%
3(三基硅基)1丙鈉(>98.0%(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(T)純度:≥98%
二基硒(>98.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)純度:≥98%
四基錫(>96.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>96.0%(GC)純度:≥98%
二二茂鋯(>97.0%(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥97%
ChirabiteAR[用于核磁共振] 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:用于核磁共振純度:≥98%
三(2,2,6,6四基3,5庚二)鐠(III)(>98%(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%(T)純度:≥98%
三(2,2,6,6四基3,5庚二)銪(III)(>95%(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%(T)純度:≥98%
三(6,6,7,7,8,8,8七氟2,2二基3,5辛二基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥98%
(S)(+)1,1'聯(lián)基2,2'雙(>97.0%(T)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥98%
(R,R)()2,3丁二(>96.0%(GC)) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:>96.0%(GC)純度:≥98%
SPHK2 鞘氨激酶2一抗 * 0.2ml Columbianetin
STK3 絲氨/蘇氨蛋白激酶3一抗 * 0.2ml Eupatilin
IKIP IKK激酶相互作用蛋白一抗 * 0.2ml Rimonabant carboxylic acid
AMACR/P504S α基?;o酶A消旋酶一抗 * 0.1ml Zeaxanthin
CASC3/MLN51 腫瘤易感候選基因3一抗 * 0.1ml Triethylenethiophosphoramide
phosphoIKKi/IKKe(Thr500) 化核因子NFκB抑制蛋白激酶i一抗 * 0.1ml Pramipexole Base
TIAF1 TGFB1誘導抗凋亡因子1一抗 * 0.2ml Pramipexole Base
Cipar1 前列腺雄激素抑制信號蛋白1一抗 * 0.2ml Genistein
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體Hpt/HP(Mouse Haptoglobin)檢測試劑盒 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Hpt/HP 檢測試劑盒 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Hpt/HP (Rabbit Haptoglobin) 檢測試劑盒 兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor) 檢測試劑盒 胎盤核糖核酸抑止劑* 規(guī)格: 48T/96T
HPL(Human placenta lactogen) 檢測試劑盒 胎盤催乳素* 規(guī)格: 48T/96T
Hp-IgM(Human Helicobacter pylori IgM) 檢測試劑盒 幽門螺旋桿菌IgM* 規(guī)格: 48T/96T
Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) 檢測試劑盒 幽門螺旋菌IgG* 規(guī)格: 48T/96T