詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質,價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 緊密連接蛋白1抗體(C端) |
英文名稱 | Claudin 1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
基雌(標準品) 英文名稱(EN):AntiDog IgGUltrapure produced in rab...規(guī)格(SP):5MG
基雌;雌 英文名稱(EN):AntiChicken IgGUltrapure produced in...規(guī)格(SP):10MG
效唑(分析標準品97.5%) 英文名稱(EN):AntiBSAUltrapure antibody produced i...規(guī)格(SP):5MG
唑(標準品) 英文名稱(EN):AntiBSAUltrapure antibody produced i...規(guī)格(SP):5MG
錫標準溶液(1000μg/ml) 英文名稱(EN):AntiBovine IgGUltrapure produced in ...規(guī)格(SP):10MG
錫標準溶液(100μg/mL,基體: 10%HCl) 英文名稱(EN):AntiBiotinUltrapure antibody produce...規(guī)格(SP):5MG
喜樹 英文名稱(EN):3,4Dimethoxyphel (purum, ≥99%)規(guī)格(SP):5G
喜樹(標準品) 英文名稱(EN):2,6Dimethoxyphel (≥99.0%)規(guī)格(SP):25G
喜樹鈉鹽 英文名稱(EN):AvidinGold Labeled antibody規(guī)格(SP):0.5ML
細胞色素C(馬源) 英文名稱(EN):2,3Dimethoxyphel (≥98%)規(guī)格(SP):2.5G
細胞色素C(牛源) 英文名稱(EN):AntiRat IgGGold antibody produced in...規(guī)格(SP):0.5ML
細胞色素C(豬源) 英文名稱(EN):AntiRabbit IgGGold antibody produced...規(guī)格(SP):0.5ML
細胞松弛素 D(>98%,,BR) 英文名稱(EN):Quinidine規(guī)格(SP):1G
細胞松弛素A(>98%,,BR) 英文名稱(EN):AntiPig IgGGold antibody produced in...規(guī)格(SP):0.5ML
細胞松弛素B 英文名稱(EN):DGlucuronic acid (≥98%, GC)規(guī)格(SP):10G
細胞松弛素C(>98%,BR) 英文名稱(EN):AntiMouse IgGGold antibody produced ...規(guī)格(SP):0.5ML
細胞松弛素E(>98%,,BR) 英文名稱(EN):AntiHuman IgM (μchain spec.)Gold p...規(guī)格(SP):0.5ML
細胞增殖示蹤熒光探針(CFDA SE) 英文名稱(EN):AntiHuman IgGGold antibody produced ...規(guī)格(SP):0.5ML
緊密連接蛋白1抗體(C端)IL-2R 檢測試劑盒 白介素2受體* 規(guī)格: 48T/96T
IL-29(human Interleukin 29) 檢測試劑盒 白介素29* 規(guī)格: 48T/96T
IL-28(human Interleukin 28) 檢測試劑盒 白介素28* 規(guī)格: 48T/96T
IL-27(Mouse Interleukin 27)檢測試劑盒 白介素27* 規(guī)格: 48T/96T
IL-27(human Interleukin 27) 檢測試劑盒 白介素27* 規(guī)格: 48T/96T
IL-27 檢測試劑盒 白介素27* 規(guī)格: 48T/96T
IL-23(Mouse Interleukin 23)檢測試劑盒 白介素23* 規(guī)格: 48T/96T