詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 鈣粘附分子10抗體 |
英文名稱 | Cadherin 10 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
金蕎麥英文名稱:Jin Qiaomai保存:20℃,,避光規(guī)格:1g蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1一抗
佩蘭英文名稱:Perrin保存:20℃,避光規(guī)格:1g鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶1β/CaMKIβ一抗
明黨參英文名稱:Changium smyrnioides保存:20℃,,避光規(guī)格:1gPSD95相關(guān)緊密連接蛋白PATJ一抗
苦楝皮英文名稱:Chinaberry bark保存:20℃,,避光規(guī)格:2g血小板源性生長因子AA+BB一抗
雞冠花英文名稱:Cockscomb保存:20℃,避光規(guī)格:2gPDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白一抗
沙英文名稱:Salbutamol保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg脂滴包被蛋白A+B一抗
舒必利英文名稱:Shu Bili保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg原鈣粘蛋白β5一抗
英文名稱:Artemisinin保存:20℃,避光規(guī)格:100mg小鼠抗萊克多巴單克隆一抗
溴右美沙芬英文名稱:Dextromethorphan Hydrobromide保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg調(diào)亡誘導因子6相互作用蛋白/多巴受體相互作用蛋白4一抗
青蒿琥英文名稱:Artesunate保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg凋亡相關(guān)蛋白6一抗
潑尼松英文名稱:Prednisone保存:20℃,避光規(guī)格:100mg凋亡相關(guān)蛋白7一抗
普生英文名稱:Nai Pusheng保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg調(diào)亡誘導因子家族蛋白PEF1一抗
唑嘌呤英文名稱:Azathioprine保存:20℃,,避光規(guī)格:50mg性核蛋白32家族B一抗
鄰位英文名稱:Ortho cresol保存:20℃,避光規(guī)格:1000mg前列EP1受體一抗
噻英文名稱:Chlorthalidone保存:20℃,避光規(guī)格:50mg脯水解酶4一抗
化鉀英文名稱:Potassium iodide保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg程序性細胞死亡2一抗
螺內(nèi)英文名稱:Spirolactone保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg核糖咪唑羧化酶一抗
鈣粘附分子10抗體小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit,48T/96T拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
大鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(CCL11)ELISA Kit,,48T/96T拉丁屬名: Issatchenkia orientalis
人紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Joosla marina
小鼠紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Arthrobacter pascens
大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)ELISA Kit,,48T/96T 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
人紅細胞生成素(EPO)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus subtilis
小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Listonella anguillarum
大鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA Kit,,48T/96T 拉丁屬名: Fusarium oxysporum