詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關(guān)蛋白抗體 |
英文名稱 | CADPS2 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
透骨香英文名稱:Gaultheria yunnanensis.保存:20℃,,避光規(guī)格:2g蛋白酶γ1一抗
土大黃英文名稱:Tu Dahuang保存:20℃,,避光規(guī)格:1g核苷還原酶M2B一抗
赤脛散英文名稱:Red tibial powder保存:20℃,避光規(guī)格:0.2g二酯酶4A一抗
余甘子英文名稱:Phyllanthus emblica L.保存:20℃,,避光規(guī)格:1.5g一種腫瘤抑制基因一抗(C端)
走馬胎英文名稱:Ardisia Gigantifolia Stapf保存:20℃,,避光規(guī)格:1gPatched/PTCH一抗
胖大海英文名稱:Pang Dahai保存:20℃,避光規(guī)格:5gPan ras一抗
地榆(地榆)英文名稱:Burnet (Sanguisorba officinalis)保存:20℃,,避光規(guī)格:2gPSP一抗
厚樸英文名稱:Maglia officinalis保存:20℃,,避光規(guī)格:0.5g外周蛋白一抗
玳瑁英文名稱:Tortoise shell保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g前列腺特異性抗原單克隆一抗(包被)
仙人掌英文名稱:Cactus保存:20℃,,避光規(guī)格:10g鼠抗前列腺特異性抗原單克隆一抗(檢測)
頭花蓼英文名稱:Polygonum capitatum保存:20℃,,避光規(guī)格:1.5g血小板活化因子受體一抗
土槿皮英文名稱:Cortex Pseudolaricis保存:20℃,避光規(guī)格:2g干擾素誘導蛋白p58ipk一抗
小葉榕英文名稱:Ficus microcarpa保存:20℃,,避光規(guī)格:20g脂酰肌醇激酶催化亞單位A一抗
鼠尾草英文名稱:Carsic acid保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支重組蛋白G一抗
澤瀉A英文名稱:Alisol A保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支抑制素/腫瘤抑制因子一抗
澤瀉B23醋英文名稱:Alisol B23 acetate保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支脂蛋白脂酶A2一抗
澤瀉A24醋,;澤瀉A醋英文名稱:Alisol A24 acetate Alisol A acetate;保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支重組金黃色葡萄球菌蛋白A一抗
鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關(guān)蛋白抗體羥類固脫氫酶17β3抗體Metandienone別名: 分子式: C20H28O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
羥基類固脫氫酶11β1抗體Dehydroepiandrosrone aceta別名: 分子式: C21H30O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
滋養(yǎng)層細胞抗原3β-HSD抗體riflunomide別名: 分子式: C12H9F3N2O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
乙?;M蛋白H4抗體2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide別名: 分子式: C10H7F3N2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
磷化高遷移率核小體結(jié)合蛋白15-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide別名: 分子式: C13H15N3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
附睪分泌蛋白4抗體2-[(1S,2S)-1-Ethyl-2-bezyloxypropyl]-2,4-dihydro-4-[4-[4-(4-hydroxyphenyl)-1-piperazinyl]phenyl]-3H-1,2,4-triazol-3-one別名: 分子式: C30H35N5O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
*基化組蛋白H3抗體Toluene-4-sulfonic acid 5-(2,4-difluorophenyl)-5-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)methyltrahydrofuran-3-ylmethyl esr別名: 分子式: C21H21F2N3O4S性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:
三羥基*基輔酶A還原酶抗體Boldenone undecylena別名: 分子式: C30H44O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報告關(guān)鍵詞:腫瘤/睪丸抗原3抗體