詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子)抗體 |
英文名稱 | Amphiregulin |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進(jìn)行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
N'(三基)L天冬酰 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
L天冬氨1芐 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
L天門冬氨1 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
L天冬氨β鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:>95%
S基L半胱氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:98%,進(jìn)口分包純度:>95%
S三基L半胱氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:>95%
L谷氨1 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.97純度:>95%
L谷氨二乙鹽鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.97純度:>95%
L谷氨5 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:>95%
N乙酰L亮氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%純度:>95%
N'CbzL鳥氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:>95%
N乙酰L丙氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:>95%
L脯氨酰 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.98純度:>95%
N乙酰L賴氨/N6三氟乙?;鵏賴氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
O芐基L絲氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
O叔丁基L絲氨 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:純度98%,BR純度:>95%
CDC45L 細(xì)胞分裂周期調(diào)控蛋白45一抗 * 0.2ml Tween80
CDCA2 細(xì)胞分裂周期蛋白2一抗 * 0.2ml PotassiumDgluconate
CEP152 中心體蛋白152一抗 * 0.2ml PF562271
CEP76 中心體蛋白質(zhì)76一抗 * 0.2ml Sodium alginate from brown;Algin
CHMP1B 染色質(zhì)修飾蛋白1B一抗 * 0.2ml Collagenase, Type1
CIRBP 冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白一抗 * 0.2ml Collagenase, Type2
CKS2 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶調(diào)節(jié)亞基2一抗 * 0.2ml Collagenase, TypeIV
CLASP1 細(xì)胞連接相關(guān)蛋白1一抗 * 0.2ml Sodium molybdate
雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長因子)抗體GCK(Human glucokinase) 檢測試劑盒 葡萄糖激酶* 規(guī)格: 48T/96T
GCA(Human gastrin cell antibody) 檢測試劑盒 胃泌素細(xì)胞抗體* 規(guī)格: 48T/96T
GC 檢測試劑盒 內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素* 規(guī)格: 48T/96T
Gbp4(Human guanylate nucleotide binding protein 4) 檢測試劑盒 鳥苷酸結(jié)合蛋白4* 規(guī)格: 48T/96T
GBM(Human glomerular basement membrane antibogy) 檢測試劑盒 抗腎小球基底膜抗體* 規(guī)格: 48T/96T
GATA4Mouse GATA binding protein 4) 檢測試劑盒 GATA結(jié)合蛋白4* 規(guī)格: 48T/96T
GATA4 檢測試劑盒 muman GATA結(jié)合蛋白4 ELISA試劑盒* 規(guī)格: 48T/96T