中性紅-亞甲藍(lán)指示劑公司正在銷售的產(chǎn)品：雞β-微管蛋白(TUBβ)試劑盒Anti-ADGRE2 Antibody糖尿病相關(guān)肽（胰島淀粉樣肽）
雞嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3(EAR3)試劑盒 Anti-ADGRE3 Antibody瓜環(huán)肽
雞胰腺特異性轉(zhuǎn)錄因子1α (PTF1α)試劑盒Anti-ADGRF1 Antibody2型豬鏈球體蛋白
雞固類生成因子1(SF1)試劑盒Anti-

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產(chǎn)品分類：指示劑

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：混合酸堿指示劑,變色點(diǎn)pH7.0

注意事項：酸色：藍(lán)紫色,堿色：綠色,。終點(diǎn)附近指示劑顏色變化的參考顏色：pH7.0藍(lán)紫色,。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

固氮菌聚集蛋白抗體Human KHDC1 ELISA Kit小鼠熱休克因子1(HSF1)免疫試劑盒

葡萄座腔菌調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體Human KHDC3L ELISA Kit小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)免疫試劑盒

檸檬黃色紅色桿菌調(diào)亡誘導(dǎo)因子抗體Human KDSR ELISA Kit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒

中國臺灣根霉間變型淋巴瘤激抗體Human KHSRP ELISA Kit小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒

煙色擬盤多毛孢α-甲基?；贵wHuman KHDRBS3 ELISA Kit小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒

假單胞菌屬膜粘連蛋白A1抗體Human KIF1C ELISA Kit小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)免疫試劑盒

葡萄座腔菌自噬相關(guān)蛋白1抗體Human KIF20A ELISA Kit小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒

膠孢β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16 抗體Human KIAA1191 ELISA Kit小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)免疫試劑盒

洋蔥伯克霍爾德氏菌腺瘤肉調(diào)節(jié)蛋白抗體Human KIAA1468 ELISA Kit小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)免疫試劑盒

乳粉  乳菌計數(shù) 銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體Human CEMIP(Cell migRation-inducing and hyaluronan-binding protein) ELISA Kit小鼠固(ALD)免疫試劑盒

德氏乳桿菌德氏亞種水通道蛋白-7抗體Human KIAA1429 ELISA Kit小鼠去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒

波蘭青霉谷基轉(zhuǎn)移1抗體Human KIAA1530 ELISA Kit小鼠趨化因子配體1(CCL1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌p21活化蛋白激ARHG7抗體Human KIAA1602 ELISA Kit小鼠趨化因子(FK)免疫試劑盒

三寶壟根霉磷化肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體Human KIDINS220 ELISA Kit小鼠趨化因子(CC基序)配體2(MRC2)免疫試劑盒

淺黃微桿菌2-基乙硫雙加氧抗體Human KIAA0430 ELISA Kit小鼠(HYD)免疫試劑盒

松杉靈芝血管緊張Ⅱ-1型受體抗體Human KIAA1984 ELISA Kit小鼠羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒

球毛殼Chaetomium│globosum Kunze 質(zhì)量規(guī)格：>98~102%,BR白介2誘導(dǎo)的T激試劑盒香蜂草苷

蘑菇輪枝菌Verticillium│psalliotae 質(zhì)量規(guī)格：>97%,分子生物學(xué)級白介2受體試劑盒香紫蘇內(nèi)酯

: AS3.14資源名稱: 曲霉 質(zhì)量規(guī)格：活：> 30 U/mg,，BC白介2可溶性受體β鏈試劑盒
中性紅-亞甲藍(lán)指示劑HL(Human hepatic lipase) ELISA Kit  人肝脂mei規(guī)格： 48T

HPA(Human Heparanase) ELISA kit  人乙酰肝sumei規(guī)格： 48T

HELIX- II (Human type II collagen helical peptide) ELISA Kit  人Ⅱ型膠原螺旋肽規(guī)格： 48T

FRA(Human fibronection related antigen) ELISA Kit  人纖維連接su相關(guān)抗原規(guī)格： 48T

GCA(Human gastrin cell antibody) ELISA Kit  人胃泌su細(xì)胞規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。