Fluo-3五鈉鹽實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限,，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：Fluo-3五鈉鹽
貨號(hào)：FSP077
產(chǎn)品規(guī)格：1 mg
分類：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸：低溫,、避光，快遞免費(fèi)送貨上門,。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 ,。
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儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān),。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,，而淬滅劑則在3’ 末端,。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅,。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離,。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,，釋放出來(lái)的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系,。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性,。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中,，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋,，不加或添加石蠟油,。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上,，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min,。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
GST瓊脂糖凝膠4FF保存CLPP Antibody100 ul

透析袋4000保存MRP3/ABCC3 (D1W1P) Rabbit mAb100 ul

磺甲基嘧啶實(shí)驗(yàn)步驟Mono-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D1P5R) Rabbit mAb100 ul

5-氟胞嘧啶保存Flightless-I Antibody100 ul

雙氫鏈霉素保存Btk (D3H5) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul

維拉帕米鹽酸鹽實(shí)驗(yàn)步驟Tyk2 (D4I5T) Rabbit mAb100 ul

百里酚藍(lán)鈉價(jià)格ADAM10 Antibody100 ul

亮綠SF（淡黃）價(jià)格Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Pacific Blue™ Conjugate)100 ul

溴甲酚綠鈉價(jià)格MLL1 (D6G8N) Rabbit mAb (Carboxy-terminal Antigen)100 ul

蘇丹Ⅱ?qū)嶒?yàn)步驟Girdin Antibody100 ul

4-氯氧鈉價(jià)格NFAT1 (D43B1) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

無(wú)瓊脂腦心浸液使用說明書Phospho-ULK1 (Ser757) (D7O6U) Rabbit mAb20 ul

豬多巴（DA）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-ULK1 (Ser757) (D7O6U) Rabbit mAb100 ul

小鼠神經(jīng)型一氧化氮合成酶（nNOS/）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-ULK1 (Ser638) (D8K9O) Rabbit mAb350 ul

小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4（NRG4）分析檢測(cè)試劑盒Color-coded Prestained Protein Marker1 Kit

小鼠前列腺素D2（PGD2）分析檢測(cè)試劑盒SimpleChIP® DNA Purification Buffers and Spin Columns100 ul

小鼠凝血因子VIIIa輕鏈（F8aLC）分析檢測(cè)試劑盒SGLT2 Antibody100 ul
Fluo-3五鈉鹽Pleurotus│pulmonarius (Fr.) Quél.分離基物: 與隆緣桉共生斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 150生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Brucella│abortus分離基物: 病料凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 作為獸用的滅活疫苗菌株培養(yǎng)基: 401生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Dietzia│schimae分離基物: 水樣/表層海水（0-5m）凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 大洋細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法

Streptomyces│sp.分離基物: 盾葉雞蛋花根際土壤1-2cm處斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性,。培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法,；定期移植法

湖淵鹽紅菌種屬: Halorubrum│lacusprofundi凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0892生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Roseivivaxhalodurans種屬: Roseivivaxhalodurans分離基物: 疊層石上的輪藻安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 168生長(zhǎng)條件: 28℃

Penicillium│thomii凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0015生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

金黃色葡萄球菌種屬: Staphylococcus aureus subsp. aureus Rosenbach分離基物: Human lesion西林瓶,，菌片安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基： 3.0g，蛋白胨 10.0g,，NaCl 5.0g,，瓊脂 20.0g(液體培養(yǎng)基不含)，蒸餾水 1.0L,，pH 7.0,。121℃，15min滅菌,。生長(zhǎng)條件: 37℃,，好氧存儲(chǔ)條件: -20℃避光保存；運(yùn)輸條件：冰袋運(yùn)輸,。

Streptomyces│platensis subsp.malvinus斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生Leucomucin A3柱晶白霉素A3,、Maridomycin麥里多霉素培養(yǎng)基: CM0039生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息）,，我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線,；
商定服務(wù)收費(fèi),、付款方式,、服務(wù)期限等,，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞）,，本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法）,，可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）,。如果由您自己提供,，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針,。
我們進(jìn)行RNA抽提,、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄,、Real-time PCR擴(kuò)增,、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,，包括實(shí)驗(yàn)過程,、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線,、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。