詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗活體。
3,、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗,。
4、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實(shí)驗,、教學(xué)實(shí)驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 21號染色體開放閱讀框128抗體 |
英文名稱 | C21orf128 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
羊抗小鼠IgG (生物... Tris(1,3dichloropropyl) Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)鋅指蛋白828一抗
羊抗人IgM (生物素... Tris(2butoxyethyl) Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)鋅指蛋白3一抗
羊抗人IgG (生物素... 2Ethylhexyl Diphenyl Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>90.0%(GC)鋅指蛋白239一抗
羊抗人IgA (生物素... Diethyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)鋅指蛋白426一抗
羊抗人C3 (生物素標(biāo)... Diisodecyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:化鋅指蛋白598一抗
葉黃素 Bis(2ethylhexyl) Azelate 質(zhì)量規(guī)格:>75.0%(GC)鋅指蛋白717一抗
兔抗羊IgG (生物素... Diisopropyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)組蛋白連接作用蛋白一抗
兔抗HRPHRP (PAP) Dibutyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)線粒體酰化酶3一抗
牛血清白蛋白 (HRP... Diisobutyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白8一抗
生物素 (HRP標(biāo)記) Dipropyl Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)組蛋白基轉(zhuǎn)移酶SMYD4一抗
親和素 (HRP標(biāo)記) Dimethyl Azelate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)化酪蛋白激酶Fyn/同步原基因一抗
兔抗綿羊IgG (HRP標(biāo)... Bis(2butoxyethyl) Adipate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)絲/蘇蛋白激酶38一抗
羊抗大鼠IgG (HRP標(biāo)... Ethyl Oleate 質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(GC)分選連接蛋白1一抗
羊抗兔IgG (HRP標(biāo)記) Ethyl Oleate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)GTP酶激活因子STARD8一抗
羊抗豬IgG (HRP標(biāo)記) Dibutyl Sebacate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)絲蛋白酶抑制劑A11一抗
羊抗小鼠IgG (HRP標(biāo)... Dimethyl Sebacate 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)神經(jīng)突出相關(guān)蛋白Slitrk1一抗
兔抗猴IgG (HRP標(biāo)記) Dictyl Sebacate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)24脫氫膽固醇還原酶一抗
21號染色體開放閱讀框128抗體200mg輕唾瓊脂培養(yǎng)(MS)礎(chǔ)738-70-570-47-396T組織蛋白酶K(CTSK)HPLC≥98%表睪試劑盒200mgYFV-IgG143-74-8化學(xué)試劑天冬轉(zhuǎn)酶(AST)100mg藍(lán)-DNA瓊脂738-70-572-18-496T組織蛋白酶K(CTSK)HPLC≥98%表達(dá)于SiSo細(xì)胞系的受體結(jié)合型腫瘤抗原檢測試劑盒200mgTFAR19143-74-8化學(xué)試劑蛋白激酶Bβ(PKBβ)
100mg藍(lán)-DNA瓊脂738-70-572-18-496T組織蛋白酶K(CTSK)HPLC≥98%表達(dá)于SiSo細(xì)胞系的受體結(jié)合型腫瘤抗原檢測試劑盒200mgTFAR19143-74-8化學(xué)試劑蛋白激酶Bβ(PKBβ)支哥倫比亞血瓊脂礎(chǔ)23256-42-073-32-596T8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)HPLC≥98%變檢測試劑盒200mgHAMA143-74-8化學(xué)試劑帕金森氏病蛋白2(PARK2)
支哥倫比亞血瓊脂礎(chǔ)23256-42-073-32-596T8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)HPLC≥98%變檢測試劑盒200mgHAMA143-74-8化學(xué)試劑帕金森氏病蛋白2(PARK2)10mgTSN瓊脂23256-42-071-00-196T膽囊收縮素A受體(CCKAR)HPLC≥98%鞭蛋白檢測試劑盒200mgEME34487-61-1化學(xué)試劑鈣蛋白酶2(CAPN2)
10mgTSN瓊脂23256-42-071-00-196T膽囊收縮素A受體(CCKAR)HPLC≥98%鞭蛋白檢測試劑盒200mgEME34487-61-1化學(xué)試劑鈣蛋白酶2(CAPN2)10mg鏈霉親和素磁珠(粒徑1μm)23256-42-0645-35-296T肌肌激酶(CKM)HPLC≥98%臂板蛋白4C檢測試劑盒200mgPLIN34487-61-1化學(xué)試劑內(nèi)切核酶G(ENDOG)
10mg鏈霉親和素磁珠(粒徑1μm)23256-42-0645-35-296T肌肌激酶(CKM)HPLC≥98%臂板蛋白4C檢測試劑盒200mgPLIN34487-61-1化學(xué)試劑內(nèi)切核酶G(ENDOG)1g1μmSCX磁珠23256-42-0393101-41-296T核糖核酶T2(RNASET2)HPLC≥98%臂板蛋白3F檢測試劑盒20mgCCDC49 Ab34487-61-1化學(xué)試劑CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)