詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化原癌基因CBL2抗體 |
英文名稱 | phospho-CBL2 (Tyr700) |
規(guī)格 | 0.1ml |
?
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
小鼠破骨細胞分化因子(ODF) 側(cè)耳屬注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289) 桿狀毛霉拉丁屬名: Mucor bacilliformis
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG) 囊軸發(fā)仙菌囊軸亞種拉丁屬名: Pilimelia columellifera subsp. columellifera
小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin) 微菌核鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces minutiscleroticus
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin) 須芒草伯克霍爾德氏菌拉丁屬名: Burkholderia andropogonis
小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU) 樣品粉碎機規(guī)格: 便攜式
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2) 產(chǎn)紫青霉拉丁屬名: Penicillium purpurogenum
小鼠α1微球蛋白(α1-MG) 大腸埃希菌拉丁屬名: coli
小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13) 蘑菇注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α) Burkholderia anthina用途: 固氮。
小鼠載脂蛋白E(Apo-E) 枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
小鼠網(wǎng)膜素(omentin) 枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
小鼠孤腓肽(OFQ/N) 大孢鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces macrosporus
小鼠蛋白酸酶(PP) 近弧狀短波單胞菌拉丁屬名: Brevundimonas subvibrioies
小鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR) 根瘤菌用途: 固氮
小鼠硫氧化還原蛋白(Trx) 秦氏蜜環(huán)菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
磷酸化原癌基因CBL2抗體癌易感基因2抗體2''-O-Coumaroyljuglanin中文名:2''-O-香豆?;臆談e名:分子式:C29H24O12
溴脫氧尿苷抗體Heveaflavone中文名:橡膠樹雙黃酮別名:分子式:C33H24O10
B細胞遷移基因2抗體Isochamaejasmin中文名:異狼毒素別名:分子式:C30H22O10
腫瘤/抗原2.2抗體7-Hydroxy-5,8-dimethoxyflavane中文名:別名:分子式:C17H16O5
腫瘤/抗原2.3抗體7,4'-Di-O-methylapigenin中文名:芹菜素-7,4'-二甲醚別名:Apigenin 7,4'-dimethyl ether分子式:C17H14O5