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實(shí)時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR,，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加,。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析,、基因表達(dá)差異分析,、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR,。
優(yōu)點(diǎn)：
(1)操作簡單,，LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行，對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,，產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷,。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT．LAMP)，不需要特殊的試劑及儀器,。
(2)快速高效,，因為不需要預(yù)先的雙鏈DNA熱變性．避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失．核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成，添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1／2,，多數(shù)情況在20,。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物,。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍，達(dá)0.5 mg／mL．應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實(shí)時定量檢測,。
(3)高特異性,，由于是針對靶序列6個區(qū)域設(shè)計的4種特異性引物。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增,。故其特異性*,。
(4)高靈敏度，對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個拷貝,，比PCR高出數(shù)量級的差異,。
用途：
1. 方便，用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實(shí)驗,。
2. 快捷,，操作步驟已經(jīng)限度地簡化，能減少污染,，降低實(shí)驗誤差,。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料，PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,，進(jìn)一步簡化了操作,。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化，反應(yīng)的靈敏度高,，特異性強(qiáng),。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,，不需要額外的加A 反應(yīng),。
使用及效果：將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板，引物和水共15 μL 混合后,，直接進(jìn)行PCR反（PCR 參數(shù)由用戶自己確定）,，反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實(shí)驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,，不同的樣本有不同要求,，實(shí)驗前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰,，也可以保存于Trizol液中,。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒。實(shí)驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A,、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,，密封保存，以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
Kovacs氏靛基質(zhì)試劑人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞  原代上皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基BSA (bovine serum albumin)  牛血清白蛋白（第五組分）

V-P甲、乙液試劑人腦血管平滑肌細(xì)胞  原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基KLH (keyhole limpet hemocyanin)  血藍(lán)蛋白

1%亞碲酸溶液人腦血管外膜成纖維細(xì)胞  原代平滑肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基OVA (ovalbumin)  雞卵白蛋白

亮綠瓊脂人腦血管周細(xì)胞  原代成纖維細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基THY (thyroglobulin,TG)  甲狀腺球蛋白

平板計數(shù)瓊脂（PCA)人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞  原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基HSA/human Serum albumin  人血清白蛋白

平板計數(shù)瓊脂（PCA)人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞   原代表皮角化細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Hu Fibrinogen  人纖維蛋白原

假單胞分離瓊脂人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞  原代系膜細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Streptavidin, SA  鏈霉親和素

假單胞分離肉湯人腦膜細(xì)胞  原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Protein G/FITC  FITC標(biāo)記蛋白-G

EEF2k/FITC  熒光素標(biāo)記真核延伸因子激酶2IgG第七號染色體開放閱讀框121-氟萘Rat GREM1 (GremLin 1) 檢測試劑盒

EGF/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長因子IgG碳酸酐酶111-氟萘Rat GDF1 (Growth Differeiation Factor 1) 檢測試劑盒

EGF-R/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長因子受體IgGα酪蛋白1-氟萘Rat GDF2 (Growth Differeiation Factor 2) 檢測試劑盒

EGFR/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長因子受體IgG細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1乙酰輔酶A三鋰鹽Rat GDF3 (Growth Differeiation Factor 3) 檢測試劑盒

EGFRvIII/FITC  熒光素標(biāo)記表皮生長因子受體III型突變體IgG細(xì)胞間粘附分子1乙酰輔酶A三鋰鹽Rat GDF5 (Growth Differeiation Factor 5) 檢測試劑盒

EGFR/PE  熒光素PE標(biāo)記表皮生長因子受體IgGCD105叔丁鎂Rat GDF9 (Growth Differeiation Factor 9) 檢測試劑盒

EGFR /Gold  金標(biāo)記表皮生長因子受體IgG軸突蛋白5叔丁鎂Rat GDF11 (Growth Differeiation Factor 11) 檢測試劑盒

Phospho-EGFR(Ser1046/1047) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠磷酸化表皮生長因子受體IgG轉(zhuǎn)錄因子COUP12,6-二氯乙Rat GDF15 (Growth Differeiation Factor 15) 檢測試劑盒
兒茶探針法PCR鑒定試劑盒他唑巴坦(標(biāo)準(zhǔn)品)Skp2 Antibody

NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物mCherry (E5D8F) Rabbit mAb

NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物IRAK1 Antibody (Human Specific)

β-NADP;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸;氧化型輔酶 IICyclophilin B (D1V5J) Rabbit mAb

鳥嘌呤鹽酸鹽Cyclic GMP XP® Assay Kit

鳥嘌呤硫酸鹽IRAK4 Antibody

腺嘌呤鹽酸鹽IRAK4 Antibody

肌苷；次核苷Phospho-Bad (Ser136) (D25H8) Rabbit mAb

肌苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-Bad (Ser136) (D25H8) Rabbit mAb

5‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)CD44 (IM7) Rat mAb (PE-Cy7®Conjugate)