詳細(xì)介紹
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加,。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析,、基因表達(dá)差異分析,、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR,。?
產(chǎn)品名稱 | 山茱萸染料法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus corni |
貨號 | FS-P99266 |
優(yōu)點:
(1)操作簡單,,LAMP核酸擴(kuò)增是在等溫條件下進(jìn)行,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷,。對于RNA的擴(kuò)增只需要在反應(yīng)體系中加入逆轉(zhuǎn)錄酶就可同步進(jìn)行(RT.LAMP),不需要特殊的試劑及儀器,。
(2)快速高效,,因為不需要預(yù)先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴(kuò)增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,,多數(shù)情況在20,。30 rain均可檢測到擴(kuò)增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴(kuò)增至109倍,,達(dá)0.5 mg/mL.應(yīng)用專門的濁度儀可以達(dá)到實時定量檢測,。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設(shè)計的4種特異性引物,。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進(jìn)行核酸擴(kuò)增,。故其特異性*。
(4)高靈敏度,,對于病毒擴(kuò)增模板可達(dá)幾個拷貝,,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進(jìn)行PCR 實驗,。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,,能減少污染,,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,,進(jìn)一步簡化了操作,。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,,特異性強(qiáng),。能擴(kuò)增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,,不需要額外的加A 反應(yīng),。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,,直接進(jìn)行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),,反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴(kuò)增結(jié)果。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
Beta-casein β-酪蛋白10%A晶型甲咪唑Conivaptan HClMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物
BAFF/CD257 F家族B細(xì)胞激活因子甲咪唑 2-氨基-3-羥基吡啶chloramphenicol/BSA 氯霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白
BAFFR/CD268 B細(xì)胞活化因子受體6-甲氧基-2-萘乙酮2-氨基-3-羥基吡啶chloramphenicol/OVA 氯霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白蛋白
bFGF/FGF-2 堿性成纖維細(xì)胞生長因子N-甲基哌2-氨基-3-羥基吡啶Geamicin/BSA 慶大霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白
BGP 骨保護(hù)蛋白/骨鈣素卡馬西平2,3-二羥基吡啶Geamicin/OVA 慶大霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白
Bid BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白磷酸咯萘啶2,3-二羥基吡啶Tetracycline/BSA 四環(huán)素偶聯(lián)牛血清白蛋白
BIN1 橋連整合因子蛋白氨酯六氯鋨酸Geamicin/FITC 熒光素標(biāo)記慶大霉素
Bim 細(xì)胞死亡調(diào)解子哈西奈德六氯鋨酸Tetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白
22號染色體開放閱讀框45尼群地平Porcine TERT (omerase Reverse Transcriptase) 檢測試劑盒
22號染色體開放閱讀框32四溴噻吩Porcine PDI (Protein Disulfide Isomerase) 檢測試劑盒
CD5L四溴噻吩Porcine MGST1 (Microsomal Glutathione S Transferase 1) 檢測試劑盒
CD63-硝基芐溴Porcine CALD (Caldesmon) 檢測試劑盒
CD9蛋白3-硝基芐溴Porcine NRG-1 (Neuregulin 1) 檢測試劑盒
CD23/FcεRII3-硝基芐溴Porcine GDF5 (Growth Differeiation Factor 5) 檢測試劑盒
CD272-硝基溴化芐Porcine (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1) 檢測試劑盒
CD302-硝基溴化芐Porcine NPYR5 (Neuropeptide Y Receptor Y5) 檢測試劑盒
山茱萸染料法PCR鑒定試劑盒磷酸腺嘌呤,,維生素B4SimpleChIP® Human KLK2 Intron 1 Primers
次 Phospho-53BP1 (Ser1618) (D4H11) Rabbit mAb
鳥嘌呤 SignalSilence® Akt siRNA I
鳥嘌呤 (標(biāo)準(zhǔn)品)SignalSilence® LC3B siRNA I
N-芐基吡咯烷-3-甲酸甲酯CD54/ICAM-1 (VF27-516) Mouse mAb
5-溴-1H-吡唑并[3,4-c]吡啶SignalSilence® LC3B siRNA II
2-甲基5-噻唑甲酸SignalSilence® LC3A siRNA I
水溶性四氮唑-8;WST-8CBFβ (D4N2N) Rabbit mAb
水溶性四氮唑-5SignalSilence® β-Arrestin 1 siRNA I
水溶性四氮唑-4SignalSilence® Beclin-1 siRNA I