詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 乙酰化組蛋白H1b抗體 |
英文名稱 | Acetyl-Histone H1.4 (K53) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
高峰淀粉酶來源于米曲霉(4000U/g) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,4000u/g純度:98%
高峰淀粉酶來源于米曲霉(100U/mg ) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,100 U/mg純度:≥98%
甘油醛3脫酶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,75U/MG純度:≥98%
菠蘿蛋白酶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>500U/MG,BR純度:≥98%
輔羧酶;羧化輔酶;焦素 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
吲哚乙 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:0.97純度:≥97%
α環(huán)糊精 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>98% >94%
氧化酶(XOD) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,,>7U/MG, powder純度:≥97%
酰化酶,L氨基?;? 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:酶活力≥30000u/g純度:≥94%
胰蛋白酶1:250 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>250U/mg,BR純度:≥95%
胰蛋白酶1:2500 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>2500U/MG純度:≥95%
阿利多 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:98%
核糖核酶A(美侖),;RNase A;核糖核酶I 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:≥50 U/mg,美侖純度:98%
5‘吡哆醛,一水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(羅氏) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,羅氏進(jìn)分純度:≥98%
NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(美侖) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>97%,國產(chǎn)美侖純度:≥98%
CARM1 蛋白精氨N基4一抗 * 0.1ml Agarose
BTN2A2 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2一抗 * 0.2ml PEG 400
AMPK alpha 1/PRKAA1 腺苷單活化蛋白激酶α1一抗 * 0.1ml Cholestyramine resin
phosphoAMPK alpha 1(Thr172) 化腺苷單活化蛋白激酶α1一抗 * 0.1ml Sucrose
TP53TG3 p53靶蛋白3一抗 * 0.2ml D(+)Trehalose, dihydrate
TP53TG5 p53靶蛋白5一抗 * 0.2ml Sodium chloride
TSPYL5 特異性Y蛋白樣5一抗 * 0.2ml Guanidine hydrochloride
UBTD1 泛素結(jié)構(gòu)域蛋白1一抗 * 0.2ml Adonitol
乙?;M蛋白H1b抗體2號(hào)染色體開放閱讀框49抗體threo-7-O-Methylguaiacylglycerol β-coniferyl ether中文名:別名:分子式:C21H26O7
2號(hào)染色體開放閱讀框50抗體Fargesin中文名:辛夷脂素別名:(+)-Fargesin分子式:C21H22O6
科凱恩氏綜合癥相關(guān)蛋白/早衰蛋白CSA抗體Deoxyschizandrin中文名:五味子甲素別名:Schisandrin A分子式:C24H32O6
7號(hào)染色體開放閱讀框65抗體Schisandrin B中文名:五味子乙素別名:分子式:C23H28O6
磷酸化絲切蛋白抗體Arctiin中文名:牛蒡子苷別名:分子式:C27H34O11