詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | Bcl-2同源拮抗劑抗體 |
英文名稱 | Bak |
規(guī)格 | 0.1ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
乙胺呋酮(AD) 球孢白僵菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
唾液酸(SA) 擬莖點霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
鞘脂(SM) 葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
尿游離皮質(zhì)(UFC) 硬水黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium aquidurense
抗釀酒酵母抗體(ASCA) 中國臺灣根霉拉丁屬名: Rhizopus formosensis
遲現(xiàn)抗原4(VLA4) 熱帶假絲酵母拉丁屬名: Candida tropicalis
吖啶橙(AO)蒼黃擬無枝酸菌拉丁屬名: Amycolatopsis lurida
喋呤(MTX) 核果黑腐皮殼菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
對氨基甲酸(PABA) 自養(yǎng)假諾卡氏菌拉丁屬名: Pseudonocardia autotrophica
氨酸(LPA) 冷海水黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium frigidimaris
免疫核糖核酸(Irna) 野油菜黃單胞菌棲絨毛致病變種拉丁屬名: Xanthomonas campestris pv. holcicola
β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI) 紅酵母注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
α半乳糖基抗體(Gal) 釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG) 半膠蘑菇(暫定名)注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
α2纖溶酶抑制物(α2-PI) 拜耳接合酵母拉丁屬名: Zygosaccharomyces bailii
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸酸(NADPH) Promicromonospora拉丁屬名: Promicromonospora xylanilytica sp
Bcl-2同源拮抗劑抗體GCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移酶抗體其它天然產(chǎn)物
同源盒蛋白GSC抗體Taxilluside A中文名:別名:分子式:C18H24O10
糖基轉(zhuǎn)移酶1結(jié)構(gòu)域1抗體n-Butyl β-D-fructofuraside中文名:正丁基-β-D-呋喃果糖苷別名:分子式:C10H20O6
GSK-3結(jié)合蛋白FRAT2抗體Palmitone中文名:棕櫚酮別名:16-Hentriacontane分子式:C31H62O
G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α11/Gα 11 抗體9-Oxooctadeca-10,12-dieic acid中文名:別名:9-Oxo-10,12-octadecadieic acid分子式:C18H30O3