詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 組蛋白H3-K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 |
英文名稱 | CLLD8 |
規(guī)格 | 0.2ml |
?
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
芴標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Lumefantrine
環(huán)酰相關物質(zhì)A標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
康唑相關物質(zhì)B標準品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
華法林標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Warfarin
三正基氧標準品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Tributyl Phosphine Oxide
卡麥角林標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Cabergoline
鹽阿夫唑嗪標準品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Alfuzosin Hydrochloride
枸櫞鉍標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Bismuth Citrate
番瀉苷A標準品 規(guī)格:20mg 英文名稱:Senside A
膽標準品 規(guī)格:2g 英文名稱:Cholic Acid (AS)
2基1,3雜茂 進口、國產(chǎn) 2Methylimidazole 含量:CP
2基1嘧5基1(4三氧基基)1 進口,、國產(chǎn) Flurprimidol 含量:高純,,98%
2基8羥基 進口、國產(chǎn) 8Hydroxyquinaldine 含量:AR
2基 進口,、國產(chǎn) oToluicacid 含量:超純,,99%
2基吲哚 進口、國產(chǎn) 2Methylindole 含量:BR,,4850℃
2氧基4基重1,5二磺鹽 進口,、國產(chǎn) FastredBsalt1,5Naphthalenedisulfonate 含量:ACS,95%
2氧基茴香 進口,、國產(chǎn) 2,4Dimethoxybenzaldehyde 含量:BR,,MV>300萬
2 進口、國產(chǎn) LPhenylglycil 含量:BR,,99%
2莰 進口,、國產(chǎn) Borneol 含量:AR,,98%
2莰 進口、國產(chǎn) Camphore 含量:CP,,96%
組蛋白H3-K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體200mgADS-17大孔吸附樹脂25389-94-0539-52-696T抗核糖核蛋白抗體(Anti-RNP)HPLC≥98%法尼二法尼轉(zhuǎn)移酶1檢測試劑盒20mgFFA33430-61-4化學試劑樣糖轉(zhuǎn)移酶(LARGE)1gCAD40大孔吸附樹脂25389-94-0537-42-896T抗Jo1抗體(Anti-Jo1)HPLC≥98%法尼醇X受體檢測試劑盒20mgi02783-74-4化學試劑鳥苷激酶1(GUK1)
1gCAD40大孔吸附樹脂25389-94-0537-42-896T抗Jo1抗體(Anti-Jo1)HPLC≥98%法尼醇X受體檢測試劑盒20mgi02783-74-4化學試劑鳥苷激酶1(GUK1)3gD001大孔強性系陽離子樹脂25389-94-010376-48-496T抗Scl-70抗體(Anti-Scl70)HPLC≥98%二酰甘油檢測試劑盒20mgProtamine102783-74-4化學試劑Goosecoid 2蛋白(GSC2)
3gD001大孔強性系陽離子樹脂25389-94-010376-48-496T抗Scl-70抗體(Anti-Scl70)HPLC≥98%二酰甘油檢測試劑盒20mgProtamine102783-74-4化學試劑Goosecoid 2蛋白(GSC2)25mgD101大孔吸附樹脂25389-94-0480-10-496T抗肝腎微粒體抗體(Anti-LKMA)HPLC≥98%二肽肽酶Ⅳ檢測試劑盒20mgIrisin93919-41-6化學試劑Goosecoid蛋白(GSC)
25mgD101大孔吸附樹脂25389-94-0480-10-496T抗肝腎微粒體抗體(Anti-LKMA)HPLC≥98%二肽肽酶Ⅳ檢測試劑盒20mgIrisin93919-41-6化學試劑Goosecoid蛋白(GSC)15mgD150大孔弱性系陽離子交換樹脂 50-07-757-10-396T絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶5(MAP4K5)HPLC≥98%二嘧啶脫酶[NADP+]檢測試劑盒20mgPokemo93919-41-6化學試劑橋尾蛋白(GPHN)
15mgD150大孔弱性系陽離子交換樹脂 50-07-757-10-396T絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶5(MAP4K5)HPLC≥98%二嘧啶脫酶[NADP+]檢測試劑盒20mgPokemo93919-41-6化學試劑橋尾蛋白(GPHN)1gD151大孔弱性系陽離子交換樹脂 50-07-7112-39-096T環(huán)胍肽(CCP)GC≥98%二嘧啶酶樣3檢測試劑盒25mgPCDH1893919-41-6化學試劑糖蛋白A33(GPA33)