詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 |
英文名稱 | ANAPC1 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
去氧皮質(zhì)新酯標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Desoxycorticosterone Pivalate
磺異噁標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Sulfisoxazole Acetyl
多粘菌素E磺標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Colistimethate Sodium
磺雙氫麥角標準品 規(guī)格:300mg 英文名稱:Ergoloid Mesylates
蛇根木標準品 規(guī)格:15G 英文名稱:Rauwolfia Serpentina
二基硅油標準品 規(guī)格:50g 英文名稱:Simethicone
后馬標準品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Homatropine Methylbromide
胰酶標準品 規(guī)格:2g 英文名稱:Pancreatin Amylase and Protease (COLD SHIPMENT REQUIRED),Diastase vera,;Pancrease
替卡松酯標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Fluticasone Propionate
磺二基嘧標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Sulfachlorpyridazine
2羥基3,5二磺鹽 進口,、國產(chǎn) HDCBS 含量:BR,95%
2羥基4氧基 進口,、國產(chǎn) 4Methoxysalicylaldehyde 含量:BR
2羥基 進口,、國產(chǎn) Salicylalcohol 含量:3N
2羥基酯 進口、國產(chǎn) Phenylsalicylate 含量:BR,,98%
2羥基單鹽 進口,、國產(chǎn) SodiumDLlactate 含量:CP,98%
2羥基鋅 進口,、國產(chǎn) Zinclactate 含量:高純,,98%
2羥基羧 進口、國產(chǎn) Citricacid 含量:BR,,99%
2去氧D葡萄糖 進口,、國產(chǎn) 2DeoxyDglucose 含量:BR,85%
2叔基5(4叔芐基)代43(二氫)噠嗪 進口,、國產(chǎn) Pyridaben 含量:BR,,98%
2羧基3異基脯 進口、國產(chǎn) Kainicacidmohydrate 含量:BR,,90%
細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體Bombyx mori Livetin,LT 檢測試劑盒 家蠶卵黃蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
BNP(Human brain natriuretic peptide) 檢測試劑盒 腦鈉素/腦鈉尿肽* 規(guī)格: 48T/96T
BNP 檢測試劑盒 腦鈉素/腦鈉尿肽* 規(guī)格: 48T/96T
BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) 檢測試劑盒 骨形成蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
BMPs(Human bone morphogenetic proteins) 檢測試劑盒 骨形成蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
BMPs 檢測試劑盒 骨形成蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
BMPs (Rabbit bone morphogenetic proteins) 檢測試劑盒 兔骨形成蛋白* 規(guī)格: 48T/96T