詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 癌基因c-Raf抗體 |
英文名稱 | Raf1 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
植物維生素C(VC) 易脆毛霉拉丁屬名: Mucor fragilis
白介素2受體(IL-2R) 板栗蛇孢日規(guī)殼拉丁屬名: Ophiognomonia castanea
β干擾素(IFN-β/IFNB)苜蓿中華根瘤菌用途: 與扁蓿豆,、苜蓿共生固氮
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2) 日本根霉用途: 用于釀酒
白三烯D4(LTD4)美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)拉丁屬名: Pleurotus sapidus
生長激素釋放因子(GH-RF) 球孢白僵菌用途: 昆蟲防治研究
巨噬細(xì)胞趨化因子(MCF) 金黃色葡萄球菌金黃亞種拉丁屬名: Staphylococcus aureus subsp. aureus
α/β干擾素受體(IFN-α/βR) 白僵菌用途: 害蟲生物防治
B細(xì)胞生長因子(BCGF) 紅曲霉用途: 用于紅色素
B細(xì)胞分化因子(BCDF) 大腸埃希菌拉丁屬名: coli
可溶性粘附分子(Sam) 亞細(xì)亞菌屬拉丁屬名: Asaia sp.
穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
多效生長因子(PTN)杏鮑菇用途: 食用菌
淋巴細(xì)胞因子膠孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,,非食用
神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF) 非無菌藥品 金黃色葡萄球菌(陽性)拉丁屬名: 非無菌藥品 金黃色葡萄球菌(陽性)
可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)Flavobacterium拉丁屬名: Flavobacterium terriphilum
癌基因c-Raf抗體組織半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性熒光定量elisa試劑盒 20次 *
組織半胱氨酸蛋白酶-1(CASPASE-1)活性比色法定量elisa試劑盒 20次 *
組織半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性熒光定量elisa試劑盒 20次 *
組織半胱氨酸蛋白酶(CASPASE)總活性比色法定量elisa試劑盒 20次 *
組織半胱氨酸(cysteine)含量高效液相色譜法定量elisa試劑盒 20次 *
組織半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量elisa試劑盒 20次 *
組織白細(xì)胞介素-1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)活性熒光淬滅法定量elisa試劑盒 20次 *
組織氨含量熒光定量elisa試劑盒 20次 *