詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。
產品名稱 | 補體C4a+C4b蛋白抗體 |
英文名稱 | C4a+C4b |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)停滯棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium stationis
胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)枯草芽孢桿菌枯草亞種拉丁屬名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13) 葡萄球菌拉丁屬名: Staphylococcus hominis
結締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ) 冰川金色單胞菌拉丁屬名: Aureimonas glaciei
免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89) 褐紅小孔菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23) 紅細菌屬拉丁屬名: Rhodanobacter panaciterrae
免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16) Corynebacterium variabile注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) 南海雷*氏菌拉丁屬名: Leisingera nanhaiensis
免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) 熱橄欖鏈霉菌褐色變種拉丁屬名: Streptomyces thermoolivaceus subsp. fuscus
粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)副豬嗜血桿菌拉丁屬名: parasuis
ω干擾素(IFN-ω/IFNB)四川散斑殼拉丁屬名: Lophodermium sichuanense
糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1) 沙漠畢赤酵母拉丁屬名: Pichia deserticola
干擾素調節(jié)因子(IRF) 灰色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces griseus
淋巴毒素β(LTB) 點枝頂孢注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
淋巴毒素α(LTA) 阿舒假囊酵母用途: 核黃素(Vitamin2)產生菌
CC趨化因子受體1(CCR1)朱紅叢赤殼拉丁屬名: Nectria cinnabarina
補體C4a+C4b蛋白抗體范可尼貧血相關蛋白M抗體Mebendazole中文名:甲苯咪唑別名:分子式:C16H13N3O3
軟骨細胞Ezrin樣蛋白抗體8-Hydroxy-7-iodo-5-quilinesulfonic acid中文名:喹方別名:分子式:C9H6I4S
慢性粒細胞白血病33抗體Ornidazole中文名:奧硝唑別名:分子式:C7H10ClN3O3
磷酸化細絲蛋白A抗體Tinidazole中文名:替硝唑別名:分子式:C8H13N3O4S
FMS樣酪氨酸激酶3配體抗體4'-Methylacetanilide中文名:乙酰對甲別名:分子式:C9H11