詳細(xì)介紹
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 |
英文名稱 | BPIL3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無(wú)菌采制)
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
大鼠腦靜脈血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
U14-GFP(小鼠子宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
NCI-H596(人肺腺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
HeLa全細(xì)胞裂解液100μg100μg
A9(小鼠下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MIO培養(yǎng)基/動(dòng)力吲哚鳥氨酸培養(yǎng)基/MIO Medium動(dòng)力,、吲哚和鳥氨酸試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
MV3(人黑色素瘤細(xì)胞)短小芽胞桿菌 Bacillus pumilus
紫色直絲鏈霉菌 Streptomyces violaceorectus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基JEG-3(人絨毛膜細(xì)胞)
TE-11(人食管細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus7.5% NaHCO3溶液
MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞皺褶假絲酵母 Candida rugosa
鐮刀菌 Fusarium sp.放射形土壤桿菌 Agrobacterium radiobacter
血管抑素(ANG)ELISA Kit for Angiostatin (ANG)規(guī)格:48T/96T
β2-微球蛋白(β2M)ELISA Kit for Beta-Microglobulin (b2M)規(guī)格:48T/96T
牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)ELISA Kit for Dentin Sialophosphoprotein (DSPP)規(guī)格:48T/96T
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21)規(guī)格:48T/96T
成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4(FGFR4)ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 4 (FGFR4)規(guī)格:48T/96T
葡萄糖6磷異構(gòu)酶(GPI)ELISA Kit for Glucose 6 Phosphate Isomerase (GPI)規(guī)格:48T/96T
生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6(GAS6)ELISA Kit for Growth Arrest Specific Protein 6 (GAS6)規(guī)格:48T/96T
腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand (TRAIL)規(guī)格:48T/96T
視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP4)ELISA Kit for Retil Binding Protein 4, Plasma (RBP4)規(guī)格:48T/96T
生長(zhǎng)分化因子5(GDF5)ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5)規(guī)格:48T/96T
肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5)ELISA Kit for Fatty Acid Transport Protein 5 (FATP5)規(guī)格:48T/96T
蛋白激酶Cα(PKCα)ELISA Kit for Protein Kinase C Alpha (PKCa)規(guī)格:48T/96T
殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體Acinetobacter baumannii分離基物: 痰提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 36℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Syntrophomonas erecta分離基物: 污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 989生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pestalotiopsis sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Thalassospira sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在石油烴類降解菌/生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 304生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Epicoccum nigrum Link分離基物: 林區(qū)土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Klebsila pneumoniae分離基物: 污泥提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 53生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Thermotogales sp.分離基物: 油井采出液提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)氫產(chǎn)乙醇培養(yǎng)基: 0483生長(zhǎng)條件: 65℃
Bacillus sp.分離基物: 油田樣品提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物采油培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 其他
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。