化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用：
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒100管/48樣 | 微量法 | 100管/48樣 | AS63211 |
商品介紹：
商品介紹 測定意義 輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物,、植物,、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循環(huán)（TCA）的主要氫受體,，生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈（ETC）傳遞把電子交給氧,，在合成ATP的同時，形成大量的ROS,，同時NADH再生為NAD+,。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過這一體系完成,。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱,。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細(xì)胞呼吸耗氧量較高，處于過氧化狀態(tài),。此外,，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外,，NAD+降解產(chǎn)物對細(xì)胞信號傳導(dǎo),、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。 測定原理 分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,，NADH通過PMS的遞氫作用,，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT）為甲瓚，在570nm下檢測吸光值,；而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,，進(jìn)一步采用MTT還原法檢測。 需自備的儀器和用品 可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、臺式離心機(jī),、移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法：
1,、血清（漿）樣品：直接檢測,。
2、細(xì)菌,、細(xì)胞或組織樣品的制備： 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液） ,，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴,，功率20％或200W，超聲3s,，間隔10s,，重復(fù)30次）8000g 4℃離心10min，取上清,，置冰上待測,。組織：按照組織質(zhì)量（g） ：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL提取液）,，進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清,，置冰上待測,。
產(chǎn)品優(yōu)點如下：
1、快速簡便：雙試劑,，直接操作,，快速、簡便,。
2,、取樣量微：需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3,、靈敏度高：檢測線0.5U/ml,，是羥胺法5倍，鄰苯三酚法的200倍
4,、穩(wěn)定性好：批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,，試劑盒2～8℃存放3個月有效。
5,、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%,。6、回收試驗： X =102.3%,。7,、受外界影響因素小：干擾因素少,，重復(fù)性強(qiáng),。且特異性強(qiáng)，不受類SOD物質(zhì)的干擾8,、測試面廣：可測動物血液,、組織、各種體液,、灌流液等,、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌,、植物組織,、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,，效果均佳,。
測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋,，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察,，待對照管顯色適當(dāng)時,，即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,，在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
乳酸脫氫酶（LDH）測試盒100管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乳酸脫氫酶（LDH）測試盒50管/24樣 輔酶Ⅰ系列
NAD蘋果酸脫氫酶（NADMDH）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
NAD蘋果酸脫氫酶（NADMDH）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
NADP蘋果酸脫氫酶（NADPMDH）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
NADP蘋果酸脫氫酶（NADPMDH）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶測試盒25管/24樣 輔酶Ⅰ系列
NADH氧化酶（NOX）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
NADH氧化酶（NOX）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
檸檬酸合酶(CS）測試盒100管/48樣 輔酶Ⅰ系列
檸檬酸合酶(CS）測試盒50管/24樣 輔酶Ⅰ系列
檸檬酸合酶(CS）測試盒25管/12樣 輔酶Ⅰ系列
丙酮酸脫羧酶（PDC）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
丙酮酸脫羧酶（PDC）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇含量測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇含量測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇脫氫酶（ADH）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
乙醇脫氫酶（ADH）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
甲醛脫氫酶（FDH）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
甲醛脫氫酶（FDH）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
乙醛脫氫酶（ALDH）測試盒100管/96樣 輔酶Ⅰ系列
乙醛脫氫酶（ALDH）測試盒50管/48樣 輔酶Ⅰ系列
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100管/48樣 輔酶Ⅱ系列
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒50管/24樣 輔酶Ⅱ系列
輔酶ⅡNADP(H)含量測試盒100管/48樣 輔酶Ⅱ系列
Rat Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ficolin-2 ELISA Kit
Ractopamine酶聯(lián)免疫試劑盒 Ractopamine ELISA Kit
Quinolones酶聯(lián)免疫試劑盒 Quinolones ELISA Kit
Pig Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Pig Ficolin-2 ELISA Kit
Phenylbutazone酶聯(lián)免疫試劑盒 Phenylbutazone ELISA Kit
Mouse Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Mouse Ficolin-2 ELISA Kit
Human Heat shock protein beta-6酶聯(lián)免疫試劑盒 Human Heat shock protein beta-6 ELISA Kit
Human cleaved microtubule-associated protein tau酶聯(lián)免疫試劑盒 Human cleaved microtubule-associated protein tau ELISA Kit
Corticosteroid酶聯(lián)免疫試劑盒 Corticosteroid ELISA Kit
Clenbuterol酶聯(lián)免疫試劑盒 Clenbuterol ELISA Kit
Chloramphenicol酶聯(lián)免疫試劑盒 Chloramphenicol ELISA Kit
Bovine Ficolin-2酶聯(lián)免疫試劑盒 Bovine Ficolin-2 ELISA Kit
Boldenone酶聯(lián)免疫試劑盒 Boldenone ELISA Kit
Beta Lactams酶聯(lián)免疫試劑盒 Beta Lactams ELISA Kit
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒100管/48樣Beta Agonists酶聯(lián)免疫試劑盒 Beta Agonists ELISA Kit
19-Nortestosterone酶聯(lián)免疫試劑盒 19-Nortestosterone ELISA Kit
斑馬魚胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)ELISA試劑盒
斑馬魚胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)ELISA檢測試劑盒
實驗方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg,，1克瓶裝,，每瓶140，000單位,，稱取0.1克肝素凍干粉,，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml,。取50～100μl濕潤管壁,，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固,。老鼠血易凝固,，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉,，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml,。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉,，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中,，濕潤管壁,，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱）,，橫向轉(zhuǎn)動，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動一次,，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固,。
二,、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種,。同時,，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿,。
1,、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存,。
2,、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后,，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存,。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑,。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽,、EDTA
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②,、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝,，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③,、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,，解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
化工儀器網(wǎng)