詳細介紹
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的定量分析,、基因表達差異分析,、基因分型。
主要技術:引物設計,、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR,。?
產(chǎn)品名稱 | 連翅探針法PCR鑒定試劑盒 |
英文名稱 | Fructus forsythiae |
貨號 | FS-P99279 |
優(yōu)點:
(1)操作簡單,LAMP核酸擴增是在等溫條件下進行,,對于中小醫(yī)院只需要水浴鍋即可,,產(chǎn)物檢測用肉眼觀察或濁度儀檢測沉淀濁度即可判斷。對于RNA的擴增只需要在反應體系中加入逆轉錄酶就可同步進行(RT.LAMP),,不需要特殊的試劑及儀器,。
(2)快速高效,因為不需要預先的雙鏈DNA熱變性.避免了溫度循環(huán)而造成的時間損失.核酸擴增在l h內(nèi)均可完成,添加環(huán)狀引物后時間可以節(jié)省1/2,,多數(shù)情況在20,。30 rain均可檢測到擴增產(chǎn)物。且產(chǎn)物可以擴增至109倍,,達0.5 mg/mL.應用專門的濁度儀可以達到實時定量檢測,。
(3)高特異性,由于是針對靶序列6個區(qū)域設計的4種特異性引物,。6個區(qū)域中任何區(qū)域與引物不匹配均不能進行核酸擴增,。故其特異性*。
(4)高靈敏度,,對于病毒擴增模板可達幾個拷貝,,比PCR高出數(shù)量級的差異。
用途:
1. 方便,,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗,。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,,能減少污染,,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,,PCR 反應液可直接上樣電泳,,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,,反應的靈敏度高,,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品,。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,,引物和水共15 μL 混合后,,直接進行PCR反(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果,。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞、血液,、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質前使用,。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務,。
Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半胱氨酸蛋白酶9尼莫地平AprepitaHuman Gas6 (Growth Arrest Specific Protein 6) 檢測試劑盒
Phospho-Caspase-9 (Try153) 磷酸化半胱氨酸蛋白酶9蒿甲雙酮-D-甘露糖Human G-CSF (Granulocyte Colony Stimulating Factor 3) 檢測試劑盒
Caveolin-1 細胞質膜微囊蛋白-1金諾芬雙酮-D-甘露糖Human GDF15 (Growth Differeiation Factor 15) 檢測試劑盒
Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) 磷酸化細胞質膜微囊蛋白-1鹽酸卡特羅甲基-三[二甲基硅氧烷基]硅烷Human GM-CSF (Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor) 檢測試劑盒
Caveolin-3 細胞質膜微囊蛋白-3氨魯米特四[二甲基硅氧烷基]硅烷Human sgp130 (soluble Glucoprotein 130) 檢測試劑盒
Alpha-Catenin α-連環(huán)蛋白大豆油四[二甲基硅氧烷基]硅烷Human HGF (Hepatocyte Growth Factor) 檢測試劑盒
Beta catenin β-連環(huán)蛋白(β鏈接素)對羥基甲酸甲酯2,5-二Human IFN-β (Ierferon Beta) 檢測試劑盒
phospho-Beta-catenin(Tyr142) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白泛酸鈉2,,5-二Human IGF-1 (Insulin-Like Growth Factor 1) 檢測試劑盒
干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原2-氯甲酰乙Porcine FRS3 (Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 3) 檢測試劑盒
CD99樣蛋白22,5-二羥基-1,4-二噻烷Porcine CH (Cholesterol) 檢測試劑盒
鈣粘蛋白相關蛋白CNA32,5-二羥基-1,4-二噻烷Porcine EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor) 檢測試劑盒
緊密連接蛋白152,5-二羥基-1,4-二噻烷Porcine CKMT1A (Creatine Kinase, Mitochondrial 1A ) 檢測試劑盒
緊密連接蛋白122-氯-3-溴噻吩Porcine ET-1 (Endothelin 1) 檢測試劑盒
CHIC2蛋白二酸單叔丁酯Porcine CKLFSF5 (Chemokine Like Factor Superfamily 5) 檢測試劑盒
磷酸化細胞周期檢測點激酶1二酸單叔丁酯Porcine HYOU1 (Hypoxia Up Regulated 1) 檢測試劑盒
磷酸化細胞周期檢測點激酶210-(1-萘基)蒽-9-酸Porcine PⅢCP (Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) 檢測試劑盒
連翅探針法PCR鑒定試劑盒BICINE,;N,N-二羥乙基甘氨酸SignalSilence® MEK2 siRNA II (Mouse Specific)
BES sodium salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉REPS1 (D6F4) Rabbit mAb
BES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸SignalSilence® PKA C-α siRNA I
黃芪多糖(68%)SignalSilence® Akt2 siRNA I (Mouse Specific)
黃芪多糖(50%)LRP1 Antibody
黃芪多糖(30%)SignalSilence® PARP siRNA I (Mouse Specific)
Fmoc-D-4-甲氧基苯氨酸SignalSilence® PARP siRNA II (Mouse Specific)
3-奎寧環(huán)酮鹽酸鹽SignalSilence® 4E-BP1 siRNA I
氟苯咪唑ARALAR/AGC1 (D5I6I) Rabbit mAb
氟苯咪唑(標準品)SignalSilence® p38α MAPK siRNA I (Mouse Specific)