詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善。
產品名稱 | 激活素受體1A抗體 |
英文名稱 | ACTR1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
紅細胞刺激因子ESF英文名稱:Human erythropoiesis stimulating factor, ESF
生長激素釋放因子GH-RF英文名稱:Human growth hormone relasing factor, GH-RF
巨噬細胞趨化因子MCF英文名稱:Human macrophage chemotatic factor, MCF
α/β干擾素受體IFN-α/βR英文名稱:Human Interferon α/βReceptor, IFN-α/βR
B細胞生長因子BCGF英文名稱:Human B cell growth protein, BCGF
B細胞分化因子BCDF英文名稱:Human B cell differetiation factor, BCDF
可溶性粘附分子Sam英文名稱:Human soluble adhesion molecules, Sam
胸腺基質淋巴細胞生成素TSLP英文名稱:Human thymic stromal lymphopoietin, TSLP
穿孔素/成孔蛋白PF/PFP英文名稱:Human Perforin/Pore-forming protein, PF/PFP
多效生長因子PTN英文名稱:Human pleiotrophin, PTN
可溶性CD28sCD28英文名稱:human soluble cluster of differentiation 28, sCD28
神經保護因子CVNPF英文名稱:Human Cobra venom neuronal protective factor, CVNPF
可溶性腫瘤壞死因子α受體sTNFαR英文名稱:Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor, sTNFαR
可溶性細胞因子受體sCKR英文名稱:Human soluble cytokine receptor, sCKR
可溶性凋亡相關因子配體sFASL英文名稱:Human soluble Factor-related Apoptosis ligand, sFASL/Apo-1
激活素受體1A抗體Pseudomonas luteola提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill.分離基物: 松墨天牛僵蟲提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Sinorhizobium miloti分離基物: 苜蓿根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 4模式菌株: no應用領域: 3.48% NaCl生長與苜蓿共生固氮培養(yǎng)基: 0053生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法,;定期移植法
均勻諾卡氏菌種屬: Nocardia uniformis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Crebrothecium ashbyii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 維酶素菌培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法,;礦物油法;定期移植法
Rhizobium radiobacter (Beijerinck and van Dden) Young et a分離基物: 扁豆根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30存儲條件: 定期移植法
Penicillium janthinlum提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃
Cryptoporus volvatus (Peck) Shear提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Pichia burtonii分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 436生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;其他