公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點,咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
SOC培養(yǎng)基粉劑 | 1L | FS-R6411 |
產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基
儲存條件 4℃,12個月
用途 轉(zhuǎn)化的熱激處理后恢復(fù)培養(yǎng)
注意事項 在SOB培養(yǎng)基中添加葡萄糖,粉劑溶解于水后,如要求無菌,應(yīng)過濾除菌,。
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,,烘干,。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水、純水洗凈,,烘干,、冷卻。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,;柱溫120℃,;進樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃,;分流進樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)THBS1 ELISA Kit色CYP3A抗體包裝25g
血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)TM ELISA Kit色cP450 CYP20A1抗體包裝5g
血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)SAA2 ELISA Kit色cP4501B1抗體包裝1g
血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)SAP ELISA Kit色cP450 CYP26A1抗體包裝5g
血紅氧合2(HO2)HO2 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝100mg
血紅氧合1(HO1)HO1 ELISA Kit磷化周期E2抗體包裝5g
血紅蛋白(HB)HB ELISA Kit周期M3抗體包裝1g
血管抑(ANG)ANG ELISA Kit周期Y/X抗體包裝250mg
血管性血友病因子(vWF)vWF ELISA Kit磷化周期D3抗體包裝1g
血管細胞粘附分子1(VCAM1)VCAM1 ELISA Kit色b5還原3抗體包裝1g
血管生成樣蛋白7(ANGPTL7)ANGPTL7 ELISA KitCWC22蛋白抗體包裝250mg
血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ANGPTL3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框95抗體包裝5g
血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)ANGPTL2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框67抗體包裝10MG
血管生成樣蛋白1(ANGPTL1)ANGPTL1 ELISA Kit磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體包裝100ml
血管生成4(ANGPT4)ANGPT4 ELISA Kit原卟啉氧化3抗體包裝25ml
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白抗體泛交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)N/A
SOC培養(yǎng)基粉劑Phospho-FRA1 (Ser265) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠化FRA-1蛋白IgG3,3-二烯 98%
FSCN1/FITC 熒光標(biāo)記纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 IgG4-(二氨) 99%
FSH/FITC 熒光標(biāo)記促卵泡激IgG3-氨巴豆酯 99%
FSH-R/FITC 熒光標(biāo)記促卵泡激受體IgG3,3-二烯酯 98%
FSP/Spastin/FITC 熒光標(biāo)記抗纖維母表面抗原IgG克羅通 97%
FST/FITC 熒光標(biāo)記抗卵泡抑IgG鹽坦索羅辛 98%
F1 operon positive regulatory protein(NT)/FITC 熒光標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端)IgG三丁膦 95%
F1 operon positive regulatory protein(CT)/FITC 熒光標(biāo)記鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端)IgG3-(異酰氧)氧硅烷 97%
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,,培養(yǎng)基,,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,,可設(shè)定50,,100,250,,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細胞類型,,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。