實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
1.稱量→溶化→調(diào)pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4.過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
脫氮付球菌培養(yǎng) 溫度:35-37℃ 英文名稱:Nitrogenremoval 培養(yǎng)保藏法:培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存,。
保存方法:
☆傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過(guò)高,,營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)于豐富,,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好,。
☆懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌,、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年,。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā),。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,,然后于冷暗處保存,,可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外,,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存,。
☆載體保存法:土壤保存法;砂土保存法,;硅膠保存法,;磁珠保存法;麩皮保存法,;紙片(濾紙)保存法,。
☆常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜,。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護(hù)劑,。此外,,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),,再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的,。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存,。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍微生物保存法,。
基本概念:
(1) 菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀,。如大腸菌群包括大腸桿菌,、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,,通常性狀相近,、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬,、葡萄球菌屬,、乳桿菌屬等,。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似,、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),,菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源,。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株,。
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脫氮付球菌價(jià)格別 名 ABH4; Abhd4; ABHD4_HUMAN; Abhydrolase domain containing 4; Abhydrolase domain-containing protein 4; Alpha/beta hydrolase 4; Alpha/beta-hydrolase 4; FLJ12816; Lyso N acylphosphatidylethanolamine lipase; Lyso-N-acylphosphatidylethanolamine lipase.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 39kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ABHD4
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,,如麩皮、豌豆浸汁,、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等,。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),,碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成,。一般情況下,,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,,少數(shù)為37 ℃,,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),,一般以大米,、小米、玉米,、麩皮,、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,,可獲得大量的孢子,。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天,。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),,有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐,。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng),。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方,。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,,一般可分為一級(jí)種子,、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,,稱為二級(jí)發(fā)酵,。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵,。同樣道理,,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵,。