商品介紹:
測(cè)定意義 SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,,裂解葡萄糖苷鍵,,催化葡萄糖基轉(zhuǎn)移到果糖、木糖,、半乳糖和鼠李糖等,,合成相應(yīng)的葡萄糖基低聚糖。此外,,SP還能催化氫醌合成熊果苷,,具有強(qiáng)的美白效果,在化妝品工業(yè)中具有重要應(yīng)用,。 測(cè)定原理 SP能夠以磷酸為受體,,催化蔗糖產(chǎn)生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸變位酶催化下變位為6-磷酸葡萄糖,,在6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用下還原NADP+生成NADPH,,導(dǎo)致340nm光吸收值增加。測(cè)定340nm吸光度增加速率,,即可計(jì)算SP活性,。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī),、恒溫水浴鍋,、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水,。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、移液器,、1 ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 | 3,、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,超聲3s,,間隔10s,,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
胞內(nèi)離子通道蛋白1(CLIC1)英文名:CLIC1 ELISA Kit粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝500g
胞漿型磷脂A2(cPLA2)英文名:cPLA2 ELISA Kit爾曼綜合癥基因1抗體包裝100mg
半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名:Gal-3 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族7抗體包裝1g
半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名:Gal-6S ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族17抗體包裝1g
半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名:caspase-3 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族12抗體包裝5g
半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)英文名:Cys-C ELISA Kit鈉ATP通道蛋白抗體包裝1g
百白破抗體(DPT)英文名:DPT ELISA KitAGXT2L2蛋白抗體包裝25g
白血病抑制因子受體(LIFR)英文名:LIFR ELISA Kitβ淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
白血病抑制因子(LIF)英文名:LIF ELISA Kit錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體包裝1g
白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)英文名:ALCAM ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移3抗體包裝250mg
白三烯E4(LTE4)英文名:LTE4 ELISA Kit二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移5抗體包裝1g
白三烯D4(LTD4)英文名:LTD4 ELISA Kit腺苷單磷脫1抗體包裝5g
白三烯C4(LTC4)英文名:LTC4 ELISA Kit紅蛋白Ank1抗體包裝1g
白三烯B4(LTB4)英文名:LTB4 ELISA Kit腺苷琥珀裂解抗體包裝100g
白介9(IL-9)英文名:IL-9 ELISA Kitα1B糖蛋白抗體包裝25g
血管緊張?jiān)贵w骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一種ATP-競(jìng)爭(zhēng)性的 Aurora kinase 抑制劑,,作用于 Aurora A,,Aurora B 和 Aurora C,IC50 分別
蔗糖磷酸化酶(SP)測(cè)試盒50管/48樣土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯結(jié)合珠蛋白Elisa
膠孢 二氫獼猴桃內(nèi)酯結(jié)核桿IgG抗體Elisa
傳染性支氣管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa
根霉屬的 4-異喹啉解脲脲原體抗體Elisa
猴頭 2-甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶鹽酸鹽解整合樣金屬蛋白12Elisa
色褐鏈霉 鹽酸去甲苯福林解整合樣金屬蛋白33Elisa
*味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合樣金屬蛋白9Elisa
香菇 4,,5-二溴-1H-1,,2,3-三氮唑金黃色葡萄球腸Elisa
魯氏毛霉 1-甲巰基環(huán)基乙酸甲酯金黃色葡萄球腸AElisa
糾纏青霉 1-羥甲基環(huán)基乙金黃色葡萄球蛋白AElisa
腐皮鐮孢 四氟酸亞鐵(II)金葡腸Elisa
阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金屬硫蛋白Elisa
淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1Elisa
玫紅假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑鹽酸鹽金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白5Elisa
乳酒假絲酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯緊密連接蛋白Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。