詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | AHA3抗體(擬南芥) |
英文名稱 | AHA3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
尼莫地平英文名稱:Nimodipine保存:20℃,,避光規(guī)格:50mg核苷結(jié)合蛋白1一抗
格列齊特英文名稱:Gliclazide保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg核苷結(jié)合蛋白2一抗
β欖香英文名稱:Beta elemene保存:20℃,避光規(guī)格:0.1ml?;D(zhuǎn)移酶10一抗
鹽羥嗪英文名稱:Hydroxyzine hydrochloride保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg絲/蘇蛋白激酶Nek7一抗
鹽倍他司汀英文名稱:Betahistine hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg核基質(zhì)蛋白22
鹽肼屈嗪英文名稱:Hydralazine hydrochloride保存:20℃,,避光規(guī)格:50mg神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)蛋白1一抗
鹽去羥嗪英文名稱:Decloxizine hydrochloride保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg絲/蘇蛋白激酶NEK1一抗
鹽去氧英文名稱:Phenylephrine hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mg腎上腺發(fā)育不全相關(guān)蛋白一抗
鹽馬普替林英文名稱:Maprotiline hydrochloride保存:20℃,,避光規(guī)格:100mgG蛋白偶聯(lián)受體66/神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體1一抗
依他尼英文名稱:Ethacrynic acid保存:20℃,避光規(guī)格:50mgG蛋白偶聯(lián)受體FM4/神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體2一抗
吲哚美辛英文名稱:Indomethacin保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg神經(jīng)肽S一抗
吲達(dá)帕英文名稱:Indapamide保存:20℃,,避光規(guī)格:100mg神經(jīng)肽S受體1/G蛋白偶聯(lián)受體154一抗
鹽羥唑啉英文名稱:Oxymetazoline hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:50mg神經(jīng)顆粒素一抗
金絲桃苷英文名稱:Hyperin保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S一抗
金雀花英文名稱:Sparteine保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支分子生物鐘調(diào)控蛋白C一抗
吉馬英文名稱:Germacrone保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支核受體0相關(guān)蛋白B家族2一抗
黃楊英文名稱:Huang Yangjian保存:20℃,,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支神經(jīng)細(xì)胞粘附蛋白NGN一抗
AHA3抗體(擬南芥)Burkholderia vesicularis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Alcanivorax nanshagensis分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 有機污染物降解菌/石油烴類降解菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 遺傳研究培養(yǎng)基: 0032生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Trichoderma sp.分離基物: 華山松健康植株樹皮提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptomyces flavotricini分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rotavirus Porcine rotavirus分離基物: 病豬提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Hirsula vermicola分離基物: 大豆田土壤腐生線蟲提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 24-26℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Vibrio sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細(xì)菌培養(yǎng)基: 961生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Candida utilis分離基物: 蜜蜂提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法