詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體 |
英文名稱 | ARTS |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA試劑盒 Phenytoin sodium>99%,BR
rabbit Histamine,HIS ELISA試劑盒Phenytoin sodium>99%,BR
rabbit Hyaluronic acid,HA ELISA試劑盒 Phenytoin sodium>99%,BR
rabbit Immuglobulin A,IgA ELISA試劑盒 Oxcarbazepine≥99.0%,BR
rabbit Immuglobulin E,IgE ELISA試劑盒Oxcarbazepine≥99.0%,BR
rabbit Immuglobulin G,IgG ELISA試劑盒Oxcarbazepine≥99.0%,BR
Rabbit inducible nitric oxide synthase,iS ELISA試劑盒 OxcarbazepineHPLC>99%,標準品
rabbit Insulin,INS ELISA試劑盒 HypericinHPLC≥98%,標準品
rabbit Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA試劑盒 D-(+)-Glucopyrase 6-phosphate1M in H2O(260Mg/ml),進口原裝
rabbit Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISA試劑盒 D-(+)-Glucopyrase 6-phosphate1M in H2O(260Mg/ml),進口原裝
rabbit intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA試劑盒 D-Gluconate 6-phosphate 3sodium salt >98%,BR
rabbit intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA試劑盒D-Gluconate 6-phosphate 3sodium salt >98%,BR
rabbit intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA試劑盒 Hydroxyprogesterone caproate/17a-Hydroxyprogesterone caproate>98%,USP32,BR
Rabbit Interferon α,IFN-α ELISA試劑盒 Hydroxyprogesterone caproate/17a-Hydroxyprogesterone caproate>98%,USP32,BR
rabbit Interferon γ ,IFN-γ ELISA試劑盒 Hydroxyprogesterone caproate/17a-Hydroxyprogesterone caproate>98%,USP32,BR
凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體谷氨酸棒桿菌種屬: Corynebacterium glutamicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 16生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
乳脂白鏈霉菌種屬: Streptomyces cremeus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0329生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Streptococcus pyogenes分離基物: 乳汁提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 396生長條件: 37
Phlinus rimosus (Berk.) Pilat分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Chaetomla sp.分離基物: 煙草提供形式: 凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 煙草發(fā)酵培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法,;定期移植法
Aspergillus awamori提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 以淀粉為原料發(fā)酵檸檬酸,。培養(yǎng)基: CM0015生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Pseudoalteromonas tetraodonis分離基物: 水樣/海冰提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/耐冷菌;產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶、酯酶培養(yǎng)基: 471生長條件: 15℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Pseudoalteromonas issachenkonii分離基物: 沉積物/表層沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 生物轉(zhuǎn)化微生物/固氮菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Candida tropicalis分離基物: 沉積樣/秋茄根底泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海酵母培養(yǎng)基: 513生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法