Millonig緩沖福爾馬林公司正在銷售的產(chǎn)品：雞糖蛋白V(GP5)試劑盒 Anti-RGN Antibody兔抗大鼠IgM抗血清
雞血小板膜糖蛋白IV (GP4/CD36)試劑盒Anti-RGS14 Antibody羊抗兔IgG抗血清
雞骨粘連蛋白(ON)試劑盒Anti-RGS3 Antibody驢抗兔IgG抗血清
雞過氧化物酶體增殖物激活受體γ( PPAR-γ)試劑盒Anti-RGS6 Ant

產(chǎn)品分類：固定液

儲存條件：室溫,12個月

用途：組織固定,更有利于保護(hù)超微結(jié)構(gòu)

注意事項：該法為Carson改良法,主要由甲醛,、磷酸鹽等組成,其福爾馬林含量為10%,。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購,！

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

哈巴苷(標(biāo)準(zhǔn)品） TetracyclineKLHDC8A蛋白抗體包裝25g

海風(fēng)藤（標(biāo)準(zhǔn)品） Ethylhydrocupreine HCl,Optochin HCl硫角質(zhì)抗體包裝5g

海金沙（標(biāo)準(zhǔn)品） Moxidectin 腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13包裝1g

?？略碥赵?/span>(標(biāo)準(zhǔn)品) Moxidectin 鋅指蛋白103抗體包裝5g

海龍(尖海龍)（標(biāo)準(zhǔn)品） Amrinone纖維母生長因子7抗體包裝1g

海南冬青苷D Amrinone肺Kruppel樣因子抗體包裝5g

海星（標(biāo)準(zhǔn)品） Carrageenan5抗體包裝100mg

海堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Taurocholate-3-sulfate,disodium salt 13抗體包裝50mg

亥茅苷（標(biāo)準(zhǔn)品） FLAG peptide15抗體包裝5g

漢(標(biāo)準(zhǔn)品) Zinc undecylenate2抗體包裝25g

漢黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品) lupanine 12抗體包裝5g

漢桃葉（標(biāo)準(zhǔn)品） Prulifloxacin G蛋白偶聯(lián)受體54抗體包裝25g

旱蓮苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Prulifloxacin 驅(qū)動蛋白家族KIF17抗體包裝5g

旱蓮苷D 5-HIAA轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體包裝100mg

蒿本內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Cefodizime acid上皮特異性蛋白1抗體包裝5MG

蘇云金芽胞桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：≥97%,BR抗線粒體抗體M2亞型試劑盒甘草二;Diammonium gly

弗氏鏈霉菌Streptomyces│fradiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR抗線粒體抗體試劑盒甘露;Mannitol

青銅小單孢菌Micromonospora│chalcea 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗紋狀體試劑盒甘;Glycine
Millonig緩沖福爾馬林Flt3 Ligand human  人Flt3 配體規(guī)格： 48T

NO mouse  一氧化氮ELISA(小鼠)規(guī)格： 48T

sTNF Alpha－RII(humen)  人可溶性腫瘤壞死因子-受體2規(guī)格： 48T

Follistatin human  人卵泡抑su規(guī)格： 48T

GCP-2 human  人中性粒細(xì)胞趨化蛋白-2規(guī)格： 48T