詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 11號(hào)染色體開放閱讀框67抗體 |
英文名稱 | C11ORF67 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
普伐他汀標(biāo)準(zhǔn)品Human CCL20 ELISA Kit純度:0.98
鹽普莫卡因標(biāo)準(zhǔn)品Human CCL2 ELISA Kit純度:0.999
磷定標(biāo)準(zhǔn)品Human CCL17 ELISA Kit純度:0.999
紅車軸提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品Human CCL11 ELISA Kit純度:0.999
水飛薊提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品Human CCL1 ELISA Kit純度:0.998
卡瓦提取物粉標(biāo)準(zhǔn)品Human CCL1 ELISA Kit純度:0.996
生姜粉標(biāo)準(zhǔn)品Human BAFF-R ELISA Kit純度:0.991
Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 豚鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T111753-200601含量測(cè)定表告依春規(guī)格:20mg
Guinea pig Immuglobulin G,IgG ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T111754-200601含量測(cè)定羅漢果苷Ⅴ規(guī)格:20mg
Guinea pig Lebtospira IgG ELISA Kit豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T111755-200601含量測(cè)定20(S)-原人參三醇規(guī)格:20mg
Guinea pig leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒 *規(guī)格:96T/48T111757-200601含量測(cè)定二基庚 A規(guī)格:20mg
Guinea pig ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T111760-200601含量測(cè)定11-羰基-β-酰香酸規(guī)格:20mg
Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA Kit豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T111761-200601含量測(cè)定桃葉珊瑚苷規(guī)格:20mg
11號(hào)染色體開放閱讀框67抗體人腎管狀上皮細(xì)胞說明書黑粉菌屬裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒
紅螺菌屬菌種裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒
啤酒酵母裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
茄病鐮刀菌藍(lán)色變種倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒
脅狀擬內(nèi)孢霉倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
須殼孢屬倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒
芽枝孢霉屬倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒
鼠傷寒沙門氏菌哥本哈根變種豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒
腸炎沙門氏菌danysz 變種豚鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
綿羊流產(chǎn)沙門氏菌豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
傷寒沙門氏菌Ty21a,ga豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒
雞沙門氏菌豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒
鼠布氏菌豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
非洲分枝桿菌豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒
母牛分枝桿菌豚鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
腸炎沙門菌豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)