詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 |
英文名稱 | phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)蘇云金芽孢桿菌松躅亞種拉丁屬名: Bacillus thuringiensis subsp. dendrolimus
大鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)矩圓黑盤孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
大鼠糖蛋白130(gp130)嗜麥芽糖寡養(yǎng)單胞菌拉丁屬名: Stenotrophomonas maltophilia
大鼠生長激素(GH)枯斑擬盤多毛孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)地衣芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus licheniformis
大鼠中性粒細(xì)胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)環(huán)發(fā)仙菌拉丁屬名: Pilimelia anulata
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)擬無枝菌酸菌拉丁屬名: Amycolatopsis sp.
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)產(chǎn)黃青霉拉丁屬名: Penicillium chrysogenum
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)費氏中華根瘤菌用途: 能在大豆上結(jié)瘤固氮,,YMA培養(yǎng)基上生長速度快,,產(chǎn)酸
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子4(bFGF-4)聚多曲霉拉丁屬名: Aspergillus sydowii
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)維氏氣單胞菌拉丁屬名: Aeromonas veronii
大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)塔賓曲霉拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) 發(fā)酵性酵母注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,,非食用
大鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)淺綠黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces galbus
大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO) 紅緣擬層孔菌拉丁屬名: Fomitopsis pinicola
大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)煙曲霉拉丁屬名: Aspergillus fumigatus
磷酸化原癌基因c-Raf抗體細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體Ciwujiaside E中文名:別名:Guaianin A分子式:C40H62O11
CD38抗體Cimigel-3-one中文名:升麻酮別名:分子式:C30H46O5
碳酸酐酶1抗體β-Hederin中文名:五加苷K別名:Eleutheroside K分子式:C41H66O11
碳酸酐酶2抗體Ketohakonal中文名:別名:分子式:C29H48O2
絲/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶抗體Casein kinase Ⅱα(CKⅡα)Tetrahymal中文名:四膜蟲醇別名:Gammaceran-3β-ol; Wallichiniol分子式:C30H52O