詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗,、研究實驗、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 錨定蛋白B抗體 |
英文名稱 | Ankyrin B |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
無水二鈉(分子生物學(xué)級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98.5%,分子生物學(xué)級純度:>95%
月桂?;“扁c(分子生物學(xué)級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>95%,分子生物學(xué)級純度:>95%
乙銨(分子生物學(xué)級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級純度:>95%
微晶纖維素(100 um) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,100 um純度:>95%
乳糖;α乳糖,一水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:>95%
化鈣二水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:>95%
乙二 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR純度:>95%
鎂七水(分子生物學(xué)級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,分子生物純度:>95%
糖化酶;葡萄糖淀粉酶 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:BR,10萬u/G純度:>95%
聚乙二4000 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:>95%
無水二鉀 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
酰 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:>95%
聚乙二8000 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級純度:>95%
化鋰(分子生物學(xué)級) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%純度:>95%
亞鐵銨六水 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99%,BR純度:>95%
紅四唑 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>95%
ZNF288/ZBTB20 指蛋白288一抗 * 0.2ml Formestane
ALOX15/15 Lipoxygenase 1 花生四15脂氧合酶1一抗 * 0.2ml Fosipril sodium
ABI3BP ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白一抗 * 0.2ml Furosemide
MTCBP1/ADI1 膜型基質(zhì)金屬蛋白酶胞質(zhì)尾結(jié)合蛋白1一抗 * 0.2ml Furosemide
BCMP11/AGR3 癌膜蛋白11一抗(前梯度同源蛋白2) * 0.2ml Gemfibrozil
ALDH1A1 胞質(zhì)脫酶1一抗 * 0.2ml Gemfibrozil
ABH8/ALKBH8 AlkB同源蛋白8一抗 * 0.2ml Gliclazide
AMFR/Gp78/RNF45 環(huán)指蛋白45/自分泌運動因子受體一抗 * 0.2ml Gliclazide
錨定蛋白B抗體Lactobacillus agilis分離基物: 淡水魚蝦提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0006生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Micromonospora sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 代謝產(chǎn)物具有抗菌活性,。培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;礦物油法;定期移植法
Penicillium oxalicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生纖維素酶培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Eutypla sp.分離基物: 沉積物/TVG沉積物提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的生物活性微生物/可能具有抗菌,、抗腫瘤活性培養(yǎng)基: 745生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法
Escherichia coli提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Psychrobacter sp.分離基物: 水樣/表層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 深海細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Enterococcus faecalis分離基物: 弱雛肝臟提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 耐藥性研究培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Psathyrla hydrophila (Bull.) Maire分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Bacillus subtilis分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物,;凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 淀粉酶培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法