詳細介紹
人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA檢測試劑盒具有如下優(yōu)點:
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性,;
三,、吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高的固相載體,;
四、適用血清,、血漿,、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型,;
五、性價比非常好,,節(jié)省實驗經費,。
產品名稱:人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Human granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit
貨號:FS-H8233
規(guī)格:96T/48T
分類:人ELISA檢測試劑盒
特異性:系統(tǒng)和其它細胞因子無交叉反應
保存:2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)
有效期:6 個月(4℃),;12 個月(-20℃)
用途:產品僅用于科研用于體外定量分析人血清,、血漿、細胞培養(yǎng)上清,、細胞裂解液
操作步驟:
產品僅用于科研實驗開始前,,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,,混勻時盡量避免起泡,。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍,。
1. 加樣:分別設空白孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔加待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘,。
2. 棄去液體,,甩干,不用洗滌,。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液100μl(取1μl物素標記抗體加99μl物素標記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),,37℃,,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,,棄去孔內液體,,甩干,洗板5次,,每次浸泡1-2分鐘,,350μl/每孔,甩干,。
4. 依序每孔加底物溶液90μl,,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見孔內有明顯藍色,,即可終止),。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色),。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性,,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值),。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測,。
標本要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心,。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,,應該再次離心,。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,。
5. 組織標本:切割標本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融。
7. 不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。基戊酸/D-lsoleucine質量規(guī)格:HPLC≥98%,,標準品包裝,;250mg。