詳細介紹
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,,它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對,。熒光基團連接在探針的5’ 末端,,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,,熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅,。但在進行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,,使得熒光基團與淬滅劑分離,。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累,。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系,。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:DiOC5(3)碘化物
貨號:FSP200
產(chǎn)品規(guī)格:100 mg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,,避免反復(fù)凍融,。
運輸:低溫,、避光,快遞免費送貨上門,。
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 ,。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2. 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,,避免反復(fù)凍融,,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。?
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,,以除去石蠟油,;否則,直接取5-10μl電泳檢測,。
操作程序:
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱,、序列等信息),,我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費,、付款方式,、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同,。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),,本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,,也可以委托本公司設(shè)計合成(費用另計),。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,,本公司不接受已溶解的引物/探針,。
我們進行RNA抽提、RNA定量,、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴增,、數(shù)據(jù)分析,。
提供實驗報告,包括實驗過程,、所用儀器試劑,、擴增曲線、標準曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。
鈣黃綠素二鈉鹽保存AMACR (2A10) Mouse mAb100 ul
硫酸奎寧二水物價格AP-2α Antibody100µl
麥芽糖醇實驗步驟β-Amyloid (1-43 Preferred) (E8C2D) Rabbit mAb100 ul
L-核糖使用說明書Mic-1 (L300) Antibody100 ul
1,6-二磷酸果糖一鈣鹽實驗步驟Phospho-Etk (Tyr40) Antibody500 ul
D-葡萄糖-6-磷酸三鈉鹽實驗步驟CD45 (HI30) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjugate)100 ul
N-癸?;?N-甲基葡糖保存AP-2α (C83E10) Rabbit mAb100 ul
L-乳酸鎂三水物保存Dvl2 Antibody100 ul
D-果糖保存Phospho-NDRG1 (Thr346) Antibody100 ul
D-木糖使用說明書CD45 (D9M8I) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 700 Conjugate)100 ul
DL-乳酸價格Dvl3 Antibody20 ul
2′-脫氧尿苷-5′-三磷酸三鈉鹽使用說明書Dvl3 Antibody100 ul
2′-氟脫氧尿苷使用說明書TRAIL (C92B9) Rabbit mAb100 ul
阿糖胸苷使用說明書Ret Antibody100 ul
轉(zhuǎn)移核糖核酸(酵母)實驗步驟Phospho-Ret (Tyr905) Antibody100 ul
聚腺苷酸實驗步驟Ret (C31B4) Rabbit mAb100 ul
護肝素實驗步驟Dvl2 (30D2) Rabbit mAb20 ul
DiOC5(3)碘化物Streptomyces│globisporus subsp. globisporus (Krassilnikov) Waks分離基物: 植物根際斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長條件: 28-30存儲條件: 定期移植法
Streptococcus│suis分離基物: 培養(yǎng)基凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于研究教學培養(yǎng)基: 396生長條件: 37
Salmonella│moscow凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 9,12 g,q -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Auricularia│auricula分離基物: 栽培段木斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 教學 培養(yǎng)基: 17生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;礦物油法,;定期移植法
Shigella│flexneri凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 5 V 7...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Peurotus│ostreatus分離基物: 土壤斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用菌培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
Bacillus│thuringiensis subsp. galleriae凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Cladosporium│paeoniae Pass.分離基物: 芍藥莖斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Streptomyces│laurentii凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: CM0015生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥