詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 人星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體 |
英文名稱 | Astrocyte |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn),。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
6基(>98%,,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,,BR純度:≥98%
7氨基頭孢 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98.0%
8羥基喹哪啶(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
9,10二溴蒽(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
雙芴(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:98%
性藍(lán)29(>50%,,Ind Grade) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>50%,,Ind Grade純度:≥98%
性藍(lán)40(>50%,BS) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>50%,BS純度:≥98%
性品紅6B(>50%,BS) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>50%,BS純度:≥98%
B1(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥98%
B2(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
G1(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:>98% >94%
G2(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥97%
茜素黃R鈉鹽 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:Ind Grade純度:≥94%
D阿洛糖(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:≥95%
αD葡萄糖1二鈉(>99.0%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>99.0%,BR純度:≥95%
α基肉桂(>98%,BR) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:>98%,BR純度:98%
Uricase 尿酶 * 0.1ml Caffeic acid
NALP2/PAN1/PYPAF2 富含亮氨重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2一抗 * 0.1ml Neomycin sulfate
Dystrophin/DMD 肌營養(yǎng)不良蛋白 * 0.1ml Neomycin sulfate
LGI1/ETL1 富含亮氨膠質(zhì)瘤失活蛋白1一抗 * 0.1ml Diphenhydramine hydrochloride
GANAB/alpha Glucosidase II α葡萄糖苷酶2一抗 * 0.1ml Diphenhydramine hydrochloride
NLG1/KIRREL2 樣蛋白1一抗 * 0.1ml Polyisinic acid
MAPK organizer 1/Morg1 絲裂原活化蛋白激酶組織蛋白1一抗 * 0.1ml Mildronate,Meldonium
PNPLA6/NTE 含patatin樣脂酶6一抗 * 0.1ml Mildronate,Meldonium
人星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體Enterococcus faecalis分離基物: 弱雛腦水腫液提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Aneurinibacillus thermoaerophilus分離基物: 硫磺提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 859生長條件: 70℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Aspergillus niger提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: 定期移植法
Beauveria bassiana提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃
Candida intermedia分離基物: 堆糟提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀酒,產(chǎn)酯培養(yǎng)基: 0013生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Yersinia pseudotuberculosis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: II培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Escherichia coli分離基物: 病鴨臟器提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Tremla fuciformis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于食用菌。培養(yǎng)基: CM0017生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;定期移植法
Streptococcus equi subsp.zooepidemicus分離基物: 病料提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;