詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 1號染色體開放閱讀框67抗體 |
英文名稱 | C1orf67 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
硼試劑 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥98%
石蕊 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:AR純度:≥99%
基橙(IND) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
基紅鈉鹽(IND) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:ACS reagent,95 %純度:≥98%
間基紅 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:指示劑純度:≥97%
紫脲銨(IND) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
紫脲銨(ACS) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:ACS純度:0.95
基紫,龍膽紫 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:0.95
黃 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
中性紅 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:BS純度:≥98%
橙黃Ⅳ 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
橙黃Ⅰ 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
藍VF 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:Indicator純度:≥98%
酞(IND) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:IND純度:≥98%
化鉀溶液(100g/L) 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:100g/L純度:≥98%
ARMER ARMER一抗 * 0.2ml Resazurin
HBXIP 乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白 * 0.2ml Celestine blue
ILP2 抑制細胞凋亡樣蛋白2一抗 * 0.2ml Azure B eosinate
Interferon alpha 6 干擾素α6一抗 * 0.2ml Limaprost
Rffl/RING finger protein 189 環(huán)指蛋白189一抗 * 0.2ml Azure II eosinate
CERKL 視網(wǎng)膜色素變性蛋白26一抗 * 0.2ml Filipin complex from Streptomyces filipinensis
Catalase 過氧化酶一抗 * 0.2ml Rosuvastatin
Adenylate kinase 2/AK2 腺苷激酶1一抗 * 0.2ml Sudan I/Solvent Yellow 14
1號染色體開放閱讀框67抗體10mg中性蛋白酶(NP)測試盒 微量法37380-42-051938-32-096T血管緊張素原(AGT)HPLC≥98%蛋白2檢測試劑盒20mgPP143380-34-5化學(xué)試劑質(zhì)抗原3(STAG3)1g中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒 分光光度法55576-66-496T脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(CETP)TLC鑒別用蛋白檢測試劑盒10mgP-LAP3380-34-5化學(xué)試劑質(zhì)抗原2(STAG2)
1g中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒 分光光度法55576-66-496T脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(CETP)TLC鑒別用蛋白檢測試劑盒10mgP-LAP3380-34-5化學(xué)試劑質(zhì)抗原2(STAG2)500mg中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒 微量法37380-43-155576-64-296T神經(jīng)型一化合酶()HPLC≥98%解整合素樣蛋白酶9檢測試劑盒20mgHPL3380-34-5化學(xué)試劑質(zhì)抗原1(STAG1)
500mg中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒 微量法37380-43-155576-64-296T神經(jīng)型一化合酶()HPLC≥98%解整合素樣蛋白酶9檢測試劑盒20mgHPL3380-34-5化學(xué)試劑質(zhì)抗原1(STAG1)200mg總抗化能力 可見分光光度法37380-43-185643-19-296T神經(jīng)型一化合酶()HPLC≥98%解整合素樣蛋白酶8檢測試劑盒20mgPLGF738-70-5化學(xué)試劑二甘脫酶(DMGDH)
200mg總抗化能力 可見分光光度法37380-43-185643-19-296T神經(jīng)型一化合酶()HPLC≥98%解整合素樣蛋白酶8檢測試劑盒20mgPLGF738-70-5化學(xué)試劑二甘脫酶(DMGDH)200mg總抗化能力 微量法567-75-996T神經(jīng)型一化合酶()HPLC≥98%解整合素樣蛋白酶33檢測試劑盒20mgFETU-A;AHSG738-70-5化學(xué)試劑酯酶D(ESD)
200mg總抗化能力 微量法567-75-996T神經(jīng)型一化合酶()HPLC≥98%解整合素樣蛋白酶33檢測試劑盒20mgFETU-A;AHSG738-70-5化學(xué)試劑酯酶D(ESD)200mg總巰測試盒 可見分光光度法19083-00-296T內(nèi)皮型一化合酶(NOS3)HPLC-SD≥98%解整合素樣蛋白酶19檢測試劑盒20mgFetuin-A738-70-5化學(xué)試劑外生骨疣蛋白1(EXT1)