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生化試劑的一些概要:二甲苯藍(lán)
生化試劑又叫生化藥品,,簡(jiǎn)稱試劑。它是工農(nóng)業(yè),、文教衛(wèi)生,、科學(xué)研究以及國(guó)防建設(shè)等多方面進(jìn)行化驗(yàn)分析的重要藥劑。生化試劑是指具有一定純度標(biāo)準(zhǔn)的各種單質(zhì)和化合物(也可以是混合物,。要進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)都離不了試劑,,試劑不僅有各種狀態(tài),而且不同的試劑其性能差異很大,。有的常溫非常安定,、有的通常就很活潑,有的受高溫也不變質(zhì),、有的卻易燃易爆:有的香氣濃烈,,有的則劇毒……。只有對(duì)生化試劑的有關(guān)知識(shí)深入了解,,才能安全,、順利進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。既可保證達(dá)到預(yù)期實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,又可消除?duì)環(huán)境的污染,。因此,,首先要知道試劑的分類情況。然后掌握各類試劑的存放和使用,。
下面是公司生化試劑產(chǎn)品:二甲苯藍(lán)
5-尿苷一磷酸二鈉鹽,,尿苷-5′-單磷酸二鈉鹽,一磷酸尿苷鈉鹽,,尿苷酸二鈉,,尿甙酸二鈉,5′-UMP,,2Na 超純,,98% 1克 3387-36-8 保存:-20℃
5克
25克
100克
5-尿苷二磷酸,尿苷-5′-二磷酸,,5′-UDP 超純,,98% 100毫克 21931-53-3 保存:-20℃
500毫克 或58-98-0
1克
5-尿苷二磷酸二鈉鹽,尿苷-5′-二磷酸二鈉鹽,,5-尿嘧啶核苷二磷酸鈉鹽,焦磷酸尿苷鈉鹽,,5′-UDP,2Na 超純,,98% 100毫克 27821-45-0 保存:-20℃
500毫克
1克
5-尿苷三磷酸二鈉鹽,尿苷-5′-三磷酸二鈉鹽,,5-尿嘧啶核苷三磷酸鈉鹽,,尿嘧啶核苷-5'-三磷酸二鈉,三磷酸尿苷二鈉,,5′-UTP,2Na 高純,,90% 500毫克 保存:-20℃
1克
5-尿苷三磷酸三鈉鹽,尿苷-5′-三磷酸三鈉鹽,,5-尿嘧啶核苷三磷酸鈉鹽,,5′-UTP,3Na 高純,98% 100毫克 19817-92-6 保存:-20℃
500毫克
1克
高純,,100mM 0.25毫升
5-尿苷三磷酸四鈉鹽,,尿苷-5′-三磷酸四鈉鹽,5′-UTP,4Na 超純,,98% 100毫克 保存:-20℃
500毫克
尿苷二磷酸葡糖醛酸,,尿苷二磷酸-α-葡糖醛酸,5ˊ-二磷酸尿苷葡糖醛酸三鈉,,尿苷[5ˊ]二磷酸[1]-α-D-葡糖醛酸三鈉鹽,,UDP-GlcA,UDPGA 生物技術(shù)級(jí),,98% 25毫克 63700-19-6 保存:-20℃
100毫克
尿苷二磷酸葡萄糖,,尿苷-5ˊ-二磷酸葡糖二鈉鹽,,葡萄糖-5ˊ-二磷酸尿苷二鈉鹽,二磷酸尿苷葡萄糖二鈉鹽,,UDP-Glc,,UDPG 生物技術(shù)級(jí),95% 25毫克 28053-08-9 保存:-20℃
100毫克
鳥苷,,鳥嘌呤核苷,,鳥嘌呤核甙,9-β-D-呋喃核苷鳥嘌呤,,9-β-D-呋喃核糖基鳥嘌呤,,鳥甙,鳥糞苷,,鳥糞素苷,,鳥嘌呤呋喃核苷,Guanosine 超純,,99% 5克 118-00-3 RT
25克
100克
500克
5-鳥苷一磷酸二鈉鹽,,5′-鳥苷酸二鈉,5'-鳥甙酸二鈉,,鳥苷酸二鈉,,鳥苷-5'-磷酸二鈉鹽,5'-一磷酸鳥苷二鈉,,5'-鳥嘌呤磷酸二鈉鹽,,5′-GMP,2Na 超純,,98% 5克 5550-12-9 2~8℃
25克
100克
500克
5-鳥苷二磷酸二鈉鹽,,鳥苷-5'-二磷酸二鈉鹽,5'-鳥嘌呤核苷二磷酸二鈉鹽,,5'-GDP,,2Na 超純,98% 100毫克 7415-69-2 保存:-20℃
500毫克
1克
5-鳥苷三磷酸二鈉鹽,,鳥苷-5'-三磷酸二鈉鹽,,5'-鳥嘌呤核苷三磷酸二鈉鹽,5'-GTP,,2Na 高純,,95% 100毫克 56001-37-7 保存:-20℃
500毫克
1克
5-鳥苷三磷酸三鈉鹽,鳥苷-5'-三磷酸三鈉鹽,,5'-鳥嘌呤核苷三磷酸三鈉鹽,,5'-GTP,3Na 高純,,95% 100毫克 36051-31-7 保存:-20℃
500毫克
1克
超純,,100mM 0.25毫升
鳥苷-3',,5'-環(huán)磷酸鈉鹽,3',5'-環(huán)一磷酸鳥苷鈉鹽,,環(huán)磷鳥苷,,鳥嘌呤核糖苷-3',5'-環(huán)磷酸酯,cGMP,,3′,5′-cGMP-Na,,cyclic GMP 超純,99% 100毫克 40732-48-7 保存:-20℃
肌苷,,次黃嘌呤核苷,,9-β-D-呋喃核糖基次黃嘌呤,9-D-核糖次黃嘌呤,,次黃苷,,肌甙,Inosine 超純,,99% 10克 58-63-9 RT
100克
500克
5-肌苷一磷酸二鈉鹽,,肌苷-5'-單磷酸二鈉鹽,5′-肌苷酸鈉,,5-單磷酸次黃嘌呤核苷二鈉,,5′-IMP,2Na 超純,,99% 1克 20813-76-7 RT
5克
25克
100克
5-肌苷二磷酸二鈉鹽,肌苷-5'-二磷酸二鈉鹽,,次黃嘌呤核苷-5'-二磷酸二鈉,,5′-IDP,2Na 高純,,98% 100毫克 54735-61-4 保存:-20℃
5-肌苷二磷酸三鈉鹽,,肌苷-5'-二磷酸三鈉鹽,次黃苷-5ˊ-二磷酸三鈉鹽,,次黃嘌呤核苷-5ˊ-二磷酸三鈉鹽,,5′-IDP,3Na 高純,,80% 100毫克 71672-86-1 保存:-20℃
5-肌苷三磷酸三鈉鹽,,肌苷-5'-三磷酸三鈉鹽,次黃苷-5ˊ-三磷酸三鈉鹽,,次黃嘌呤核苷-5ˊ-三磷酸三鈉鹽,,5′-ITP,3Na 高純,,98% 250毫克 35908-31-7 保存:-20℃
1克
5-肌苷三磷酸二鈉鹽,,次黃嘌呤核苷-5'-三磷酸二鈉,,三磷酸肌苷二鈉,5′-ITP,,2Na 高純,,90% 250毫克 36051-67-9 保存:-20℃
1克
三磷酸脫氧核糖核苷酸,脫氧核糖核苷-5′-三磷酸,,寡核苷酸緩沖液,,dNTPs 4種混合,10mM,,種 500ul 保存:-20℃
500ul*100支
4種分開,,套,100mM,,種 0.1ml*4支
1ml*4支
2′-脫氧腺苷,,2′-脫氧腺甙,去氧胰苷,,去氧腺嘌呤配糖,,去氧腺核苷,脫氧腺嘌呤核苷,,9-β-D-2ˊ-脫氧呋喃核苷腺嘌呤,,2′-Da 超純,99% 1克 16373-93-6 RT
5克
25克
2′-脫氧腺苷-5′-單磷酸,,脫氧腺苷單磷酸,,脫氧腺苷酸,dAMP 高純,,98% 250毫克 653-63-4 保存:-20℃
1克
常用生化試劑作用:
1,、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,,在尿素和SDS中穩(wěn)定,。一般工作濃度是50—100μg/ml,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2,。
2,、SDS:十二烷基硫酸鈉,溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),,因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜,,并解離細(xì)胞中的核蛋白,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀,。
3,、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等,。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,,所以它和乳糖一樣,,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,,四聚體解聚成單體,,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類,。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解,。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選,。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定,。
4,、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,,在IPTG的催化下顯藍(lán)色,。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。
5,、G418:一種抗生素,,對(duì)幾乎所有的細(xì)胞都有毒性,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑,。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后,,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá),,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng),。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移,、基因敲除,、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用,。
6,、DMSO:二甲基亞砜。實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑,,同時(shí)用作測(cè)試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物,。能溶于所有烷烴和烯烴。
7,、曲拉通X-100:TritonX-100,,用的細(xì)胞裂解液成分之一,在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用,, 能力介于NP40和SDS之間,,偏向于NP40,。
8、NP-40:很溫和的去垢劑,,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,,而對(duì)核膜破壞的作用弱,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白,。
9,、BSA:牛血清白蛋白, 主要起維持滲透壓作用,、PH緩沖作用,、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)中,,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用,。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。
10,、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,,也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。
11,、TEMED:四甲基乙二胺,。促凝劑。在中性及堿性pH條件下,,加入TEMED可加速凝膠聚合,。
12、巰基乙醇:一種強(qiáng)還原劑,??蛇€原蛋白二硫鍵,,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),,有利于與SDS的結(jié)合,。使蛋白解離成單個(gè)亞基,。
13,、甲叉雙丙烯酰胺:N,,N'-甲叉雙丙烯酰胺,,別名MBA,,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,,次甲基雙丙烯酰胺,,N,N'-甲撐雙丙烯酰胺,。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠,。
14、過(guò)硫酸銨:過(guò)硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合,。
15,、B27:一種添加劑,用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng),,被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用,。
16、DTT:二硫蘇糖醇,,常用還原劑,,既有抗氧化作用。它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán),,維持還原性環(huán)境,,穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,,破壞二硫鍵,,濃度不同,起到的作用也不同,。
17,、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激,。為了減少副作用,,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體,。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,,可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,,并刺激局部免疫反應(yīng),。
18、吐溫 20:Tween-20 ,,常用的非離子去垢劑,。
19、吐溫 80:weenum 80 ,,除作乳化劑外,,也用作某些水中難溶藥物的增溶劑,。
20.,、十二烷基肌氨酸鈉 :脫細(xì)胞試劑,制備脫細(xì)胞組織工程支架材料,。21.PVPP:PVPP對(duì)片劑具有崩解作用,,能和各種不溶于水的藥物共容,,能穩(wěn)定化各種懸浮劑,又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等,,因而可用作醫(yī)藥助劑,。也用于除去啤酒中的多酚。22,、PIPES:哌嗪-N,,N'-二(2-乙磺酸),實(shí)驗(yàn)室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸),,pKa是6.80,。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng),價(jià)格比較貴,。常用在免疫和細(xì)胞類的實(shí)驗(yàn)中,,PIPES有時(shí)還被用來(lái)制備大腸桿菌感受態(tài)。23,、CTAB:十六烷基三乙基溴化銨,,一種去污劑,可溶解細(xì)胞膜,,它能與核酸形成復(fù)合物,,在高鹽溶液中((0.7 mol/L NaCl)是可溶的,當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度(0.3 mol/L NaCl)時(shí),,從溶液中沉淀,,通過(guò)離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白,多糖類物質(zhì)分開,。zui后通過(guò)乙醇或異丙醇沉淀DNA,,而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室zui常用的一種提取核酸的手段,。24,、HEPES:羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑,,主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化,。在開放式培養(yǎng)條件下,培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境,,CO2氣體迅速逸出,,pH迅速升高,若加了HEPES,,此時(shí)可以維持pH7.0左右,。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES。
25、MOPS:一種緩沖液,,有抑制RNA酶的作用,,一般和甲醛(用于變形RNA)用于RNA變性電泳。26,、鹽酸胍:鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用,。27,、PMSF:Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟,。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜,、眼睛及皮膚,吸入,、吞進(jìn)或通過(guò)皮膚吸收后有致命危險(xiǎn),。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應(yīng)立即用大量水沖洗之,。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄,。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中,。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí),,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,,這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié)為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數(shù)小時(shí)后,可安全地予以丟棄,。
28,、溴酚藍(lán):pH指示劑,pH=3.0時(shí)呈黃色,,pH=4.6時(shí)呈藍(lán)紫色,。酸堿指示劑;非水滴定用指示劑,,蛋白電泳染色,;病毒化驗(yàn)等。29,、臺(tái)盼蘭:臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭,,是細(xì)胞活性染料,常用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性,。30,、二甲苯青FF:用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料,, 易溶于水和醇,可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer,。31、吖啶橙:是一種熒光色素,,與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光,。該染料具有膜通透性,能透過(guò)細(xì)胞膜,,使核DNA和RNA染色,。在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜,,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光,;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,,形成凋亡小體,。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒,;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失,。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞,、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間,,這樣在DNA復(fù)制過(guò)程中,,會(huì)使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基,造成移碼突變,。吖啶橙染液有毒,,操作時(shí)要戴手套,需避光,。32,、EDTA和EGTA:EDTA--乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬,、稀土元素和過(guò)渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物,。此外EDTA也可用來(lái)使有害放射性金屬?gòu)娜梭w中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑,。EGTA--乙二醇雙(2-氨基乙基)四乙酸在Mg2+存在下測(cè)定Ca2+時(shí),,可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,,比用EDTA滴定提高了選擇性。此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差,。33,、TRICINE:N-[三(羥甲基)甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris-甘氨酸系統(tǒng),;Tris-Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,,能夠獲得較好的分離效果??梢杂们罢叽?。34、PVP40:PVP40 中的CO - N = 有很強(qiáng)的結(jié)合酚類化合物的能力,,與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物,,常用于提取RNA時(shí)除去酚類。35,、脫氧膽酸鈉:離子型去垢劑,,作用有:1、裂解細(xì)胞,;2,、溶解蛋白,尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白,,如膜蛋白等,;3、很適合做WB,,但在Co-IP中使用,,需要謹(jǐn)慎。36,、6-BA:細(xì)胞培養(yǎng)中用到,,細(xì)胞分裂素。37,、碘代乙酰胺:也叫作碘乙酰胺,,2-碘乙酰胺。用于有機(jī)合成,,在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑,,用于多肽測(cè)序以及酶抑制劑等,蛋白組學(xué)級(jí)試劑,。38,、萘乙酸:NAA,為廣譜性植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,??纱龠M(jìn)細(xì)胞分裂,,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,,增加坐果率等39,。番紅O與藏紅T:氧化還原指示劑、生物染色,、酸堿指示劑,,滴定分析亞硝酸鹽。40,。TTC:2,,3,,5-三苯基氯化四氮唑(紅四氮唑),,多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑,在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC(0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中),,細(xì)菌菌落長(zhǎng)成紅顏色,,對(duì)去除食品本底顆粒物干擾非常有意義。