醛品紅染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠破骨激因子1 (OSF)試劑盒Anti-PDE10A Antibody5-羥色受體2B抗體
豚鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95/TNFRSF6)試劑盒 Anti-PDE4D Antibody5-羥色受體3A抗體
豚鼠磷酸化外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒Anti-PDE5A Antibody5-羥色受體3D+3E抗體
豚鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL)試劑盒

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：結(jié)締染色

儲存條件：4℃,避光,12個(gè)月

用途：又稱醛復(fù)紅染色液

注意事項(xiàng)：由堿性品紅和三聚乙醛等反應(yīng)而成,成熟的染液呈深紫色,。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存，在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

益母草（標(biāo)準(zhǔn)品） Ac-Trp-Oet磷化熱休克蛋白70抗體包裝1g

益智(益智仁)（標(biāo)準(zhǔn)品） N-Acetyl-DL-tryptophanE3泛蛋白連接HACE1抗體包裝5g

益智（標(biāo)準(zhǔn)品） Nalpha-Formyl-DL-tryptophan結(jié)節(jié)性硬化癥蛋白1抗體包裝250mg

薏苡仁（標(biāo)準(zhǔn)品） L-Tyrosine tert-butyl ester 肝核因子4α抗體包裝1g

薏苡仁油（標(biāo)準(zhǔn)品） O-Benzyl-L-tyrosine磷化肝核因子4α抗體包裝100g

茵陳(濱蒿)（標(biāo)準(zhǔn)品） O-Benzyl-L-tyrosine benzyl ester hydrochloride淋巴特異性解旋抗體包裝25g

茵陳（茵陳蒿）（標(biāo)準(zhǔn)品） O-Benzyl-L-tyrosine methyl ester hydrochlorideHRAS樣抑制因子2抗體包裝5g

茵芋苷 L-Valine t-butyl ester hydrochloride熱休克蛋白家族40抗體包裝1g

羊藿(羊藿)（標(biāo)準(zhǔn)品） 4-Nitro-L-phenylalanine monohydrate糖蛋白P43抗體包裝5MG

羊藿次苷F2 N-Acetyl-DL-Alanine滋養(yǎng)層抗原3β7抗體包裝5g

羊藿次苷I(標(biāo)準(zhǔn)品) Ac-DL-Glu-OH熱休克蛋白-22抗體包裝25ml

羊藿苷(標(biāo)準(zhǔn)品) DL-a-Aminoadipic acid組織H4受體抗體包裝5ml

羊藿(標(biāo)準(zhǔn)品) DL-Cysteine·HCl·H2O羥基類固脫氫11β2抗體包裝100g

羊藿新苷A;羊藿屬苷A DL-Cysteine hydrochloride組織H3受體抗體包裝25g

銀椴苷,；椴樹苷（標(biāo)準(zhǔn)品） DL-Cystine磷化組蛋白H1抗體包裝1g

米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測定硫角質(zhì)試劑盒基麥冬黃烷B;Methylophio

24164=BCRC80272資源名稱: 中國臺灣鞘單胞菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,MAO-B selective inhibitor硫雌試劑盒基麥冬黃烷A;Methylophio

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>98%硫S-基轉(zhuǎn)換試劑盒7-氧基;7-Methoxyco
醛品紅染色液Collagen II  II 型膠原(抗原)規(guī)格： 0.5mg

CXCR1 (CXC-chemokine receptor 1)  細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原規(guī)格： 0.5mg

COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2)  前列腺su氧化環(huán)化mei2(抗原)規(guī)格： 0.5mg

c-phycocyanin(C-PC)  C-藻藍(lán)su(藻藍(lán)蛋白)規(guī)格： 0.5mg

CTGF (connective tissue growth factor)  結(jié)締組織生長因子(多肽抗原)規(guī)格： 0.5mg

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。