詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點,,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
TAF固定液 | 500ml | FS-R6827 |
產品分類:固定液
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:又稱為三羥基乙胺福爾馬林固定液,,主要由甲醛,、三羥基乙胺、去離子水組成,,該固定液適合于線蟲的固定
配制與標定的實驗原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,烘干,。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿,。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,;柱溫120℃,;進樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃;分流進樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠,。
鬧羊花III Emodin低密度脂蛋白受體的誘導降解蛋白抗體包裝25g
鬧羊花V Rhein鋅指蛋白144抗體包裝5g
鬧洋花(標準品) Rhein生肌決定因子Myf5抗體包裝100g
擬人參皂苷F11(標準品) Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside磷化生肌決定因子Myf5抗體包裝25g
擬人參皂苷Rh2(標準品) Pectolinarin黑皮質2受體輔助蛋白2抗體包裝500g
擬人參皂苷RT5(標準品) Hordenine金屬硫蛋白3抗體包裝1g
鳥苷 Danshensu絲裂原活化蛋白激MAP4K6抗體包裝5g
尿囊(標準品) Danshensu擬南芥MAP65蛋白抗體包裝5MG
檸檬苦,黃柏內酯(標準品,橙皮提取) Sodium Danshensu神經干RNA結合蛋白Musashi1抗體包裝1g
檸檬苦,;吳茱萸內酯(標準品,吳茱萸提取) Tanshinone I粘膜粘附分子1抗體包裝5g
牛白藤(標準品) Tanshinone I髓過氧化物抗體包裝1g
牛蒡苷元(標準品) Tanshinone IIA膜相關鳥苷反轉激1抗體包裝25g
牛蒡子(牛蒡子)(標準品) Tanshinone IIA神經突觸前膜胞內蛋白13抗體包裝5g
牛蒡子苷(標準品) Tanshinone IIA-sulfonic sodium高度保守基因相關蛋白Membralin抗體包裝100g
牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標準品) Salvianolic acid A運動神經元及胰腺同源蛋白1抗體包裝25g
巨大芽胞桿菌Bacillus│megaterium 質量規(guī)格:BS抗型肝炎病試劑盒多舌飛蓬苷;6’-O-Caffeoyle
古德氏分枝桿菌Mycobacterium│goodii 質量規(guī)格:BS(生物染色)抗基底節(jié)試劑盒丁香樹脂雙葡萄糖苷;Syringare
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規(guī)格:AR抗肌內膜抗體試劑盒當藥寧;Swertianin
TAF固定液 Alpha-IFN-b (humen) 抗大鼠α干擾su受體規(guī)格: 48T
Activin A 大鼠活化su A規(guī)格: 48T
ALCAM 大鼠白細胞活化粘附因子規(guī)格: 48T
cAMP 大鼠環(huán)-磷suan腺規(guī)格: 48T
ANG 大鼠血管緊張su規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,,培養(yǎng)基,,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),,即劑量反應性曲線,,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),,至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,,設定合適范圍內的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例,,可設定50,,100,250,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當細胞過于稠密,,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細胞類型,轉染,,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。