產(chǎn)品分類(lèi):固定液
儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月
用途:各種組織固定,不含醛類(lèi)物質(zhì),又稱(chēng)無(wú)毒環(huán)保型固定液。
注意事項(xiàng):用于病理樣本和動(dòng)物組織固定,也可用于脫落細(xì)胞,、培養(yǎng)細(xì)胞的固定,。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),,咨詢(xún)并訂購(gòu),!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
環(huán)保組織固定液 | 500ml | FS-R6802 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來(lái)水、純水洗凈,,烘干,、冷卻。
2,、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn),搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,,培養(yǎng)基,,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn),來(lái)確定最佳篩選濃度,。
一般而言,,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應(yīng)曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,,其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
磺雙氫麥角堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 21-Acetoxypregnenolone相似腫瘤抑制基因HUGL抗體包裝1g
基多巴(標(biāo)準(zhǔn)品) phelloptorin白介1β抗體包裝25g
基黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Ellagic acidβ-乳球蛋白抗體包裝5g
基蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品) D-Tetrahydropalmatine脂質(zhì)磷磷相關(guān)蛋白1/可塑性相關(guān)基因3抗體包裝100g
基麥冬二氫高異黃A,基麥冬黃烷A 4-Bromobenzylamine神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體包裝25g
基麥冬黃A(標(biāo)準(zhǔn)品) Ganoderenic acid B富含亮重復(fù)家庭蛋白1抗體包裝500g
基麥冬黃烷B Tetrahydropalmatine富含亮重復(fù)家庭蛋白4抗體包裝1g
溴東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetrahydropalmatine瘦受體抗體(長(zhǎng))包裝5g
假人參皂苷RT1 Pregnenolone Acetate白血病抑制因子抗體包裝1g
見(jiàn)血飛(標(biāo)準(zhǔn)品) Pregnenolone AcetateNogo受體反應(yīng)蛋白抗體包裝25g
劍麻皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Chitosan凋亡抑制蛋白抗體包裝5g
箭根薯(標(biāo)準(zhǔn)品) Chitosan層粘連蛋白抗體包裝100g
江南卷柏(標(biāo)準(zhǔn)品) AllicinLpin1 抗體包裝25g
江藤苷 α-CyperoneLpin1 抗體包裝5g
姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品) Cefaclor溶菌抗體包裝1g
暗棕色桿菌Phaeobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99%抗軟骨抗體試劑盒肥皂草;Saponin
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:含量≥98.0%抗?fàn)盍霾?7型試劑盒法林二;Falcarindiol
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗絨毛膜促性腺激抗體試劑盒蜂斗菜內(nèi)酯A;Bakkenolide A
環(huán)保組織固定液IGF-1 人胰島su樣生長(zhǎng)因子-1規(guī)格: 48T
IGF- II 人胰島su樣生長(zhǎng)因子-Ⅱ規(guī)格: 48T
ICAM- I 人細(xì)胞間粘附因子-Ⅰ規(guī)格: 48T
VCAM-1 人血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附因子-1規(guī)格: 48T
VEGFR2/VEGF-R2/Flk1(human) 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2規(guī)格: 48T