詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 血小板糖蛋白GPIb抗體 |
英文名稱 | CD42b |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,,特異性強,,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
海蘇特氏菌 Jooslamarina
嗜鹽四聯(lián)球菌 Tetragecoccushalophilus
空腸彎曲桿菌 Campylobacterfetussubsp.jejuni
Massiliaconsociate Massiliaconsociate
Naxibactervarians Naxibactervarians
明亮發(fā)光? .. Photobacteriumphosphoreum
木醋桿菌 Acetobacter xylinum=Gluconacetobacter xylinus
宋氏志賀氏菌 Shigellasonnei
朝鮮芽孢八疊球菌 Sporosarcinakoreensis
泛養(yǎng)副球菌 Paracoccuspantotrophus
心鈉肽(ANP)ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP)規(guī)格:48T/96T
親環(huán)素B(CYPB)ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB)規(guī)格:48T/96T
組蛋白H2A(H2A)ELISA Kit for Histone H2A (H2A)規(guī)格:48T/96T
彈性蛋白(ELN)ELISA Kit for Elastin (ELN)規(guī)格:48T/96T
胃動素(MTL)ELISA Kit for Motilin (MTL)規(guī)格:48T/96T
生長激素(GH)ELISA Kit for Growth Hormone (GH)規(guī)格:48T/96T
L選擇素(SELL)ELISA Kit for Selectin, Leukocyte (SELL)規(guī)格:48T/96T
間隙連接蛋白43(CX43)ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)規(guī)格:48T/96T
E選擇素(SELE)ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE)規(guī)格:48T/96T
轉狀腺素蛋白(TTR)ELISA Kit for Transthyretin (TTR)規(guī)格:48T/96T
過氧化酶(CAT)ELISA Kit for Catalase (CAT)規(guī)格:48T/96T
緊密連接蛋白1(TJP1)ELISA Kit for Tight Junction Protein 1 (TJP1)規(guī)格:48T/96T
血小板糖蛋白GPIb抗體糖基轉移酶25結構域2/前膠原半乳糖基轉移酶2抗體(+)-Noe's reagent別名: 分子式: C24H38O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
糖基轉移酶28家族1抗體1,2-Bis(3-indenyl)ethane別名: 分子式: C20H18性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
糖基轉移酶6結構1抗體(R,R)-2,6-Bis(4-isopropyl-2-oxazolin-2-yl)pyridine別名: 分子式: C17H23N3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體(R,R)-2,6-Bis(4-phenyl-2-oxazolin-2-yl)pyridine別名: 分子式: C23H19N3O2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
磷化糖皮質(zhì)激素受體抗體Bis(carboxymethyl) trithiocarbona別名: 分子式: C5H6O4S3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
葡萄糖轉運蛋白6抗體2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol別名: 分子式: C24H26O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
糖皮質(zhì)激素受體β抗體2-Benzoylacetanilide別名: 分子式: C15H13NO2性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞:
胰島葡萄糖6磷酶2抗體trans,trans-Bis(4-fluorobenzal)acetone別名: 分子式: C17H12F2O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務: 隨貨提供1H-NMR等報告關鍵詞: