Hoechst 33258實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,，后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。

產(chǎn)品特點(diǎn):
靈敏度高：產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高,，熒光信號(hào)強(qiáng)
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
Hoechst 33258	25 mg/100 mg	FSP172

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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測(cè),、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取,、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip  EMSA,、CHIP,、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色,、特殊染色,、組織切片、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型,、動(dòng)物模型構(gòu)建
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使用方法：
注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻,，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū),；陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,，可直接使用,。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管,，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液,、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管),。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū),。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物,、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋,，于6,000rpm離心10s,，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū),。
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR,，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的,。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加,。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段,，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期,。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系,，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù),。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析,。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值,。
大鼠γ干擾素受體（IFN-γR）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Bcl-2 (Ser70) (5H2) Rabbit mAb100 ul

大鼠β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）分析檢測(cè)試劑盒MEP50 (P328) Antibody1 Kit

大鼠α-輔肌動(dòng)蛋白1（ACTN-1）分析檢測(cè)試劑盒PTMScan® Phospho-Ser/Thr-Pro Motif [p(S/T)P] Kit100 ug

大鼠S100B蛋白（S-100B）分析檢測(cè)試劑盒CD3 (17A2) Rat mAb (PE Conjugate)100 ul

大鼠CD34分子（CD34）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-cPLA2 (Ser505) Antibody100 ul

大鼠apelin 12（AP12）分析檢測(cè)試劑盒cPLA2 Antibody100 ul

大鼠Agouti相關(guān)蛋白（AGRP）分析檢測(cè)試劑盒NeuroD Antibody100 ul

猴皮質(zhì)醇（COR）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-Bcl-2 (Ser70) (5H2) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

魚(yú)黑色素分析檢測(cè)試劑盒Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb20 ul

人胰島細(xì)胞價(jià)格Neurofilament-L (DA2) Mouse mAb100 ul

人血管內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Neurofilament-H (RMdO 20) Mouse mAb20 ul

人角膜內(nèi)皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Neurofilament-H (RMdO 20) Mouse mAb100 ul

人卵巢癌組織源細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Neurofilament-L (C28E10) Rabbit mAb20 ul

大鼠食管上皮細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Neurofilament-L (C28E10) Rabbit mAb100 ul

小鼠卵巢成纖維細(xì)胞說(shuō)明書(shū)Neurofilament-M (RMO 14.9) Mouse mAb20 ul

小鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞報(bào)價(jià)Neurofilament-M (RMO 14.9) Mouse mAb100 ul

CT26.WT（小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞）報(bào)價(jià)SHIP2 (C76A7) Rabbit mAb100 ul
Hoechst 33258Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: pQE類表達(dá)質(zhì)粒的受體菌，攜帶質(zhì)粒pREP4,，Km抗性：25 ug/ml,。培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Aspergillus│oryzae斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造醬油,。培養(yǎng)基: CM0085生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法；其他

Gliocladium│roseum斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

大腸埃希氏菌(大腸桿菌)種屬: Escherichiacoli安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 改造寄主培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 37℃

鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Influenzavirus A│Avian influenza virus分離基物: 病雞呼吸道和大部分的消化道凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 實(shí)驗(yàn)研究其生物學(xué)活性,，并進(jìn)一步從基因水平上進(jìn)行分析,。培養(yǎng)基: 0生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Streptococcus│agalactiae凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌芯片培養(yǎng)基: 56生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

嗜根考克氏菌種屬: Kocuria│rhizophila凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗生物質(zhì)殘留檢查,。培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法

Streptomyces│candidus斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 代謝產(chǎn)物具有弱的抗菌活性。培養(yǎng)基: 0027生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；礦物油法；定期移植法