詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗,、研究實驗,、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 9號染色體開放閱讀框71抗體 |
英文名稱 | C9orf71 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
磺二氫標準品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Dihydroergotamine Mesylate
奧沙利鉑標準品(系統(tǒng)使用性用) 規(guī)格:25mg 英文名稱:
核黃素標準品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Phosphated Riboflavin
奧沙利鉑對照品標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Oxaliplatin
馬尿標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Amihippuric Acid
多沙唑嗪相關(guān)雜質(zhì)F標準品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
鹽去氧標準品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Phenylephrine Hydrochloride
奧沙利鉑相關(guān)物質(zhì)D標準品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
托西芐銨標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Bretylium Tosylate
馬來伏沙明標準品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Fluvoxamine Maleate
L2基3巰基鹽鹽 進口、國產(chǎn) LCysteineHydrochlorideAnhydrous 含量:BR,,99%
L2基 進口、國產(chǎn) Lrvaline 含量:BR,,99%
L2羥基 進口、國產(chǎn) L(+)Lacticacid 含量:BR,,20mg/ml
L2基3基 進口,、國產(chǎn) NAcetylLValine 含量:BR,,98%
Lα基β 進口,、國產(chǎn) LPhenylalanine 含量:BR,,99%
LαN基β吲哚 進口,、國產(chǎn) NAcetylLtryptophan 含量:BR,98%
Lα基β羥基 進口,、國產(chǎn) LThreonine 含量:BR,,99%
Lα基二 進口,、國產(chǎn) LGlutamicacid 含量:BR,,99%
Lα基異 進口,、國產(chǎn) LValine 含量:BR,,99%
Lβ對羥基基 進口、國產(chǎn) LTyrosine 含量:BR,,99%
9號染色體開放閱讀框71抗體25mg植物葉綠素(chlorophyll)含量檢測試劑盒 微量法9013-34-7102841-43-096T細胞周期素D3(CCND3)HPLC≥98%抗中性粒/中心體抗體檢測試劑盒20mgUP56-75-7化學試劑內(nèi)收蛋白3(ADD3)15mg醇式羧化酶(PEPC)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9013-34-7480-16-096T細胞周期素D3(CCND3)HPLC≥98%抗增殖細胞核抗原檢測試劑盒20mgUI56-75-7化學試劑內(nèi)收蛋白2(ADD2)
15mg醇式羧化酶(PEPC)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9013-34-7480-16-096T細胞周期素D3(CCND3)HPLC≥98%抗增殖細胞核抗原檢測試劑盒20mgUI56-75-7化學試劑內(nèi)收蛋白2(ADD2)25mg醇式羧化酶(PEPC)活性檢測試劑盒 微量法9013-34-762596-29-696T細胞周期素D3(CCND3)HPLC≥98%抗硬皮病抗體70檢測試劑盒20mgUGT108321-42-2化學試劑腺苷激酶3(AK3)
25mg醇式羧化酶(PEPC)活性檢測試劑盒 微量法9013-34-762596-29-696T細胞周期素D3(CCND3)HPLC≥98%抗硬皮病抗體70檢測試劑盒20mgUGT108321-42-2化學試劑腺苷激酶3(AK3)200mg3-甘油脫酶(GAPDH)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9013-34-761-54-196T熱休克蛋白β2(HSPβ2)HPLC≥98%抗抑制素B抗體檢測試劑盒20mgUGT1108321-42-2化學試劑腺苷激酶4(AK4)
200mg3-甘油脫酶(GAPDH)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9013-34-761-54-196T熱休克蛋白β2(HSPβ2)HPLC≥98%抗抑制素B抗體檢測試劑盒20mgUGT1108321-42-2化學試劑腺苷激酶4(AK4)200mg3-甘油脫酶(GAPDH)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9013-34-7464-74-496T熱休克蛋白40(HSP40)HPLC≥98%抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體檢測試劑盒20mgUGT8108321-42-2化學試劑腺苷激酶1(AK1)
200mg3-甘油脫酶(GAPDH)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法9013-34-7464-74-496T熱休克蛋白40(HSP40)HPLC≥98%抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體檢測試劑盒20mgUGT8108321-42-2化學試劑腺苷激酶1(AK1)500mg3-甘油脫酶(GAPDH)活性檢測試劑盒 微量法9013-34-7146501-37-396T熱休克蛋白90(HSP90)HPLC≥98%抗異亮酰tRNA連接酶,細胞質(zhì)檢測試劑盒20mgUK1405-41-0化學試劑外核苷焦酶/二酯酶3(ENPP3)