詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯載體如BSA,、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
產品名稱 | cornichon樣蛋白抗體 |
英文名稱 | CNIH3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯)胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體。
3,、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
假交替單胞菌現貨,,ATCC菌株
鼠李糖乳桿菌培養(yǎng),,ATCC菌株
雙歧雙歧桿菌保存,ATCC菌株
噬糖鹽紅菌售價,,ATCC菌株
師崗鏈霉菌現貨,,ATCC菌株
彎曲芽孢桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
副凝聚短狀桿菌保存,,ATCC菌株
成團腸桿菌(成團泛菌)售價,,ATCC菌株
支鏈α-脫酶(BCKDK)ELISA Kit for Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK)規(guī)格:48T/96T
分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit for Secretory Immuglobulin A (sIgA)規(guī)格:48T/96T
DEAD框肽5(DDX5)ELISA Kit for DEAD Box Polypeptide 5 (DDX5)規(guī)格:48T/96T
無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)規(guī)格:48T/96T
賴酰氧化酶(LOX)ELISA Kit for Lysyl Oxidase (LOX)規(guī)格:48T/96T
CD72分子(CD72)ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 72 (CD72)規(guī)格:48T/96T
抑肽酶(AP)ELISA Kit for Aprotinin (AP)規(guī)格:48T/96T
Toll樣受體6(TLR6)ELISA Kit for Toll Like Receptor 6 (TLR6)規(guī)格:48T/96T
過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha (PPARgC1a)規(guī)格:48T/96T
沙漠刺猬因子(DHH)ELISA Kit for Hedgehog Homolog, Desert (DHH)規(guī)格:48T/96T
Slit同源物3(Slit3)ELISA Kit for Slit Homolog 3 (Slit3)規(guī)格:48T/96T
溶質載體家族1成員5(SLC1A5)ELISA Kit for Solute Carrier Family 1, Member 5 (SLC1A5)規(guī)格:48T/96T
cornichon樣蛋白抗體200mgDA201大孔吸附樹脂1405-10-3436-05-596T抗Ⅱ型膠原蛋白抗體(Anti-CⅡAb)HPLC≥98%二化酶檢測試劑盒10mgapo-A114999-52-1化學試劑高爾體蛋白A3(GOLGA3)200mgDM130大孔吸附樹脂1400-61-916562-13-396T153kDa核孔蛋白(NUP153)HPLC≥98%兒茶抑素試劑盒10mgapo-A295648-77-4化學試劑高爾體蛋白A4(GOLGA4)
200mgDM130大孔吸附樹脂1400-61-916562-13-396T153kDa核孔蛋白(NUP153)HPLC≥98%兒茶抑素試劑盒10mgapo-A295648-77-4化學試劑高爾體蛋白A4(GOLGA4)15mgHPD-BJQH大孔吸附樹脂1400-61-9541-15-196T絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)HPLC≥98%兒茶檢測試劑盒20mgApo-A450-89-5化學試劑高爾體蛋白A5(GOLGA5)
15mgHPD-BJQH大孔吸附樹脂1400-61-9541-15-196T絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)HPLC≥98%兒茶檢測試劑盒20mgApo-A450-89-5化學試劑高爾體蛋白A5(GOLGA5)30mgHP-20大孔吸附樹脂1400-61-996T抗OJ抗體(Anti-OJ)HPLC≥98%鵝膏蕈試劑盒5mgapo-B10050-89-5化學試劑高爾體蛋白A6(GOLGA6)
30mgHP-20大孔吸附樹脂1400-61-996T抗OJ抗體(Anti-OJ)HPLC≥98%鵝膏蕈試劑盒5mgapo-B10050-89-5化學試劑高爾體蛋白A6(GOLGA6)25mgHPD100大孔吸附樹脂1400-61-9215776-78-696T抗組蛋白抗體(AHA)HPLC≥98%多藥耐藥相關蛋白檢測試劑盒5mgapo-B4850-89-5化學試劑高爾體蛋白A7(GOLGA7)
25mgHPD100大孔吸附樹脂1400-61-9215776-78-696T抗組蛋白抗體(AHA)HPLC≥98%多藥耐藥相關蛋白檢測試劑盒5mgapo-B4850-89-5化學試劑高爾體蛋白A7(GOLGA7)200mgH103大孔吸附樹脂69-57-81029017-75-196T脂酶A1(PLA1)HPLC≥98%多效生長子檢測試劑盒10mgapo-C150-89-5化學試劑甘油-O-酰轉移酶(GNPAT)