詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體 |
英文名稱 | CACNA1G |
規(guī)格 | 0.1ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸,;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4,、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
多巴胺D2受體(D2R)核盤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP) 芽胞桿菌ATCC 9372,;(曾用名:枯草芽胞桿菌黑色變種)拉丁屬名: Bacillus atrophaeus
食欲素/阿立新B(OX-B)枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
促睡眠肽(DSIP)戊糖乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus pentosus
精氨酸加壓素(AVP) 枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)拱狀靈芝拉丁屬名: Ganoderma fornicatum
微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)*灰葡萄孢用途: 進(jìn)行分析檢測(cè)及抗病性鑒定,,指導(dǎo)。
神經(jīng)絲蛋白(NF)Chitinophagaceae sp.拉丁屬名: Chitinophagaceae sp.
利尿肽(KP) 巴氏醋桿菌巴氏亞種拉丁屬名: Acetobacter pasteurianus subsp. pasteurianus
神經(jīng)降壓素(NT) 阪崎腸桿菌拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
γ肽(Pγ)類干酪乳桿菌拉丁屬名: Lactobacillus paracasei
C型鈉尿肽(CNP)囊狀匐柄霉拉丁屬名: Stemphylium vesicarium
阿立新A(Orexin A)香菇用途: 食用,、藥用
腦腸肽(BGP/Gehrelin)蘇云金芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
前心鈉肽(Pro-ANP)參土地桿菌拉丁屬名: Pedobacter ginsengisoli
制瘤素M受體(OSMR)Rhizobium vitis用途: 植物冠癭病害,,遺傳轉(zhuǎn)化材料
電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體組蛋白替換精蛋白DGGR1抗體(+)-Perillaldehyde中文名:(+)-紫蘇醛別名:分子式:C10H14O
透明質(zhì)酸及粘蛋白4抗體8,9-Dehydrothymol isobutyrate中文名:8,9-去氫百里香酚異丁酯別名:分子式:C14H18O2
熱休克蛋白90α/HSP90 α抗體Thymol isobutyrate中文名:百里香酚異丁酯別名:Thymyl isobutyrate分子式:C14H20O2
心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白1抗體Dicliripariside A中文名:別名:分子式:C32H48O14
雌激素下調(diào)基因1蛋白抗體8-Hydroxy-9,10-diisobutyryloxythymol中文名:8-羥基-9,10-二異丁酰氧基麝香草酚別名:分子式:C18H26O6