公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),,咨詢并訂購(gòu),!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
甲基紅指示劑 | 100ml | FS-R6900 |
產(chǎn)品分類:指示劑
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:?jiǎn)我凰釅A指示劑,,常用于實(shí)驗(yàn)室用水指示劑法檢查pH值
注意事項(xiàng):甲基紅變色范圍:pH4.2-6.3,顏色由紅變黃。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,,烘干,。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來(lái)水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對(duì)照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10,、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
鹽普克索 Sodium bismuthate過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體包裝500g
鹽普克索無(wú) Sodium diatrizoate dihydrate過(guò)氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體包裝100g
鹽普魯 Sodium fluoroaluminate朊病蛋白CD230抗體包裝100g
鹽普羅帕 Sodium hippurate孕激受體β(MPRβ)抗體包裝500g
鹽普莫 Sodium laurate前列腺F2a受體抗體PGF2αR包裝1g
鹽去羥 Sodium metaaluminate泛基賴抗體包裝5g
鹽噻加賓 Sodium metavanadate dehydrate核糖體p70 S6蛋白激抗體包裝1g
鹽賽庚啶 Sodium n-caprylatep53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體包裝5g
鹽賽洛唑啉 Sodium oxamateBcl-2轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體包裝250g
鹽三 Sodium phenyl phosphate, dehydrate磷脂爬行3抗體包裝5mg
鹽舍曲林 Sodium-2-naphthalenesolfonate骨骼肌線粒體膜蛋白PARL抗體包裝10MG
鹽司來(lái)吉蘭 Span* 20多核苷磷化蛋白抗體包裝100g
鹽司維姆 Stains-All胃腸道相關(guān)酪激抗體(蛋白酪激5)包裝25g
鹽坦洛新/鹽坦索羅辛 Strontium carbonatePEST含核蛋白抗體包裝5g
鹽溴己新 Strontium sulfate磷化p53結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
褐紅小孔菌Microporus│affinis (Blume & T. Nees) Kuntze 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品胱抑B試劑盒磺間二氧嘧啶;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
: 29資源名稱: O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品胱抑A試劑盒鹽環(huán)沙星;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書
鼠傷菌Salmonella│typhimurium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)胱天蛋白激活的脫氧核糖核試劑盒脫氫乙-對(duì)照品;有報(bào)告
甲基紅指示劑MIP-1 Alpha/CCL3(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Alpha) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α規(guī)格: 48T
MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子規(guī)格: 48T
M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子規(guī)格: 48T
MIC-1 human ELISA kit 人巨噬細(xì)胞抑制因子-1 ELISA 試劑盒規(guī)格: 96T
MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人單核細(xì)胞趨化蛋白3規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來(lái)確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜,;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,,其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。