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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

Pfu DNA

參   考   價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號:

品       牌:

廠商性質(zhì):代理商

所  在  地:上海市

更新時(shí)間:2016-12-22 15:57:02瀏覽次數(shù):1859

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目錄號規(guī)格備注價(jià)格說明書下載
E002-01A250U含dNTP230元
E002-01BA包裝×5含dNTP1035元
E002-02A250U不含dNTP 180元
E002-02BA包裝×5不含dNTP 810元
 

· Pfu DNA 聚合酶內(nèi)容 (250 U)

Pfu DNA聚合酶(5 U/μl)50 μl
dNTP 混合液 (各10 mM)250 μl
10 × Pfu Buffer with Mg2+1 ml

 

· 聚合酶說明 
本酶為Pyrococcus furiosus中分離的pfu DNA pol 基因在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后經(jīng)多次純化分離而得。聚合酶具有3’-5’外切酶(校正)活性,,當(dāng)聚合反應(yīng)發(fā)生堿基錯(cuò)配時(shí),,聚合酶的校正活性可將錯(cuò)配的堿基切除,。聚合酶為使用范圍zui廣的高保真DNA聚合酶,其錯(cuò)誤率僅為1.3x10-6,,推薦聚合酶用于需高保真的PCR反應(yīng)。 

· 聚合酶用途 
用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng),,包括克隆PCR、DNA片段拼接,、引入突變、全基因合成等(參見 Sinobio 實(shí)驗(yàn)方案)。 

· 聚合酶產(chǎn)品特點(diǎn) 
高保真:聚合酶是使用zui廣泛的高保真酶,,其保真度為普通Taq酶的10倍,。
靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段(圖例一),。
快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配置,。
便利:10μl, 25μl 或50μl體系全部適用,。 

· 質(zhì)量保證 
經(jīng)多次柱純化,,SDS-PAGE檢測純度大于95%;
PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,,無核酸內(nèi),、外切酶污染。 

· 聚合酶使用建議

聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,,無3’端"A"突出,其PCR產(chǎn)物的克隆有兩種方案,。
1. PCR前引物進(jìn)行5’端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中(參見 Sinobio實(shí)驗(yàn)方案),。
2. 將產(chǎn)物3’末端加A后再與T-Vector連接(參見 Sinobio 實(shí)驗(yàn)方案),。
3. 由于聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加引物的長度,,理想的引物長度為20-30堿基,。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,盡量在冰上配置反應(yīng)體系,,并zui后加入Pfu酶。

· 相關(guān)圖片

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