· 制品內容 （250 U） | Fast Pfu DNA聚合酶（5 U/μl） | 50 μl | | dNTP 混合液 （各10 mM） | 250 μl | | 5 × Fast Pfu Buffer with Mg2+ | 2000 μl |
· 制品說明
Pfu DNA聚合酶為zui常用的高保真DNA聚合酶,，在需高保真的PCR反應中廣范使用,然而Pfu酶擴增靈敏度不高，延伸速度緩慢（0.5kb/分鐘）給眾多的使用者帶來了不便,。針對普通Pfu酶的以上缺點,，SinoBio采用分子進化技術對普通Pfu酶進行改造，制備的新型聚合酶Fast Pfu酶具有快速,、高靈敏度,、抗干擾能力強等特點，是新一代的高保真DNA聚合酶,。使用Fast Pfu能獲得更理想的擴增結果,，并大幅度縮短擴增反應時間。
· 用 途
用于要求保真度比較高的PCR反應,，包括克隆PCR,、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等（參見 SinoBio 實驗方案）,。
· 產品特點
高保真：具有同Pfu酶相同的保真度,，為普通Taq酶的10倍。
快速：Fast Pfu擴增速度為普通Pfu酶的數倍,，72℃保溫30秒可延伸1kb以上,。
高效：以λDNA為模板，擴增長度可達12kb,，能高效擴增≤6kb片段,；對于人基因組DNA等復雜模板，能有效擴增出3kb特定基因片段,。
*配方的5×Buffer：使PCR擴增反應更加穩(wěn)定,、靈敏、高效,。
· 質量保證
經多次柱純化,，SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶；PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留,，無核酸內,、外切酶污染。
· 使用建議 Fast Pfu DNA聚合酶產生的PCR產物為平滑末端,，無3’端"A"突出,， 其PCR產物的克隆有兩種方案：
1.PCR前引物進行5’端加磷修飾或將PCR產物磷酸化處理后再直接克隆于平滑末端的載體中（參見 Sinobio 實驗方案）。
2.將產物3’末端加A后再與T-Vector連接（參見 SinoBio 實驗方案）,。 *由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解,。因此在設計引物時應適當增加引物的長度，理想的引物長度為 20-30堿基,。另外為了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,， 盡量在冰上配置反應體系，并zui后加入Fast Pfu酶,。,。
· 相關圖片  · 其他說明 |
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