產(chǎn)品名稱：植物維生素D3 ELISA試劑盒

英文名稱：Plant Vitamin D3,VD3 ELISA KIT

Elisa實驗前的準(zhǔn)備
　　1仔細閱讀說明書
　　2確定試劑盒在有效期內(nèi)
　　3按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量,、體積）
　　4標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存）,，盡量分裝做備份,。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存
　　5準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品,，如試管,、吸頭、移液器,、離心機等
　　6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
　　7按說明書將所用試劑平衡至室溫,，配制所需試劑
　　DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
　　8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對,；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體,；從同一家公司選擇抗體對,。
　　9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋,。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
　　10標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,，注意每批的細節(jié),。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶,，盡可能多地收回其中的細胞因子,。根據(jù)每批說明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復(fù)溶,。
　　11一般待測抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程,、放大試劑盒,、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度,。
　　12為了優(yōu)化靈敏度,，建議隔夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
　　13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),，應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
　　14當(dāng)測定混合液體中的抗原時,，如血清,，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.

實驗過程中加樣可能碰到的問題:
1、過長(特別是室內(nèi)溫度較高時),；
2,、手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間,；
3,、加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣,。
相應(yīng)解決辦法：
1,、標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘,；若在幾天內(nèi)檢測,，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存,，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi),。
2、加樣后及時放入孵箱,。
3,、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4,、如果采用AT或其他全自動加樣,，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5,、標(biāo)本較多時,，請分批操作。 

   ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病,、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,，認為ELISA法具有靈敏、特異,、簡單,、快速,、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點,。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查,。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,，所以也是一種早期診斷的良好方法,。

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