詳細(xì)介紹
兔子透明質(zhì)酸 elisa原理 elisa法
產(chǎn)品名稱(chēng):兔子透明質(zhì)酸ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):rabbit Hyaluronic acid,HA ELISA KIT
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
1.棄去液體,,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,,輕輕混勻,,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘,。
2.溫育60分鐘后,,棄去孔內(nèi)液體,甩干,,洗板3次,,每次浸泡1-2分鐘,200μl/每孔,,甩干,。
3.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,,60分鐘,。
4.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,,200μl/每孔,,甩干。
5.依序每孔加底物溶液90μl,,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),,此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔顯色不明顯,,即可終止),。
6.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液,。
7.用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值),。在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)備注:
1.用戶(hù)在初次使用試劑盒時(shí),,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,,以便試劑集中到管底。
2.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,,該孔不加任何試劑,,只是zui后加底物溶液及終止液,。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3.為防止樣品蒸發(fā),,試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,。
4.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,,請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素標(biāo)記抗體工作液,、或辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5.建議檢測(cè)樣品時(shí)均設(shè)雙孔測(cè)定,,以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
兔子透明質(zhì)酸 elisa原理 elisa法